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KG-1细胞(人急性髓系细胞白血病细胞)说明书

点击次数:40 发布时间:2022/9/1 14:21:25
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肖**
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  细胞特性:KG1细胞系由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立。骨髓抽自一个59岁的患有红白血病而后又发展成急性骨髓原性白血病的男性白人。KG1细胞在形态上类似急性髓原白血病,表现为明显的多形化,骨髓母细胞和骨髓细胞占优势。少量细胞是成熟的粒细胞,也有微量的巨噬细胞和嗜曙红细胞。
  1)来源:人白血病
  2)形态:淋巴细胞样,悬浮生长
  3)含量:>1x10
  6个/T25方瓶
  4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
  5)规格:T25方瓶
  细胞接受后的处理:
  1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
  2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25方瓶置于37℃培养箱约2-3h。
  3)将T25方瓶中培养液及细胞转移至2个50mL离心管中,1000RPM离心5分钟,然后将每管部分培养液上清回收以便后续培养此细胞继续使用,每管留取底部5mL培养液重悬细胞沉淀进行培养。
  4)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
  细胞用途:仅供科研使用。
  本公司的细胞培养操作规程,供参考
 一.培养基及培养冻存条件准备:
  1)完,全培养基:IMDM+20%FBS++1%双抗
  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%
  3)冻存液:70%IMDM,20%血清,10%DMSO,现用现配。
  二.细胞处理:
  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加入5mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入培养瓶中培养。
  2)细胞传代:当细胞密度达到1X106/mL时即进行传代培养
  1.将培养瓶中细胞轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液。
  2.按照2-4X105/mL细胞量密度用新鲜培养基重悬细胞,按照上述推荐接种密度将5mL新鲜培养液移入到T-25培养瓶中或15mL新鲜培养液移入到T-75培养瓶中培养。
  3.每间隔2-3天对细胞进行换液或传代培养。
  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞直接计数后离心,用70%IMDM+20%FBS+10%DMSO冻存液重悬细胞沉淀,按每1ml的数量分配到冻存管中。
  本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

原创作者:智立中特(武汉)生物科技有限公司

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