KU812人外周血嗜碱性白血病细胞操作说明

细胞名称KU812人外周血嗜碱性白血病细胞

种属人

年龄（性别）男；38岁

组织来源器官：外周血； 疾病：慢性髓性白血病； 细胞类型：嗜碱性

生长特性悬浮

细胞形态骨髓母细胞样

背景描述KU812细胞是从一位慢性髓性白血病患者暴发期的外周血建立的细胞株，KU812细胞至少有一个Ph1(费城)染色体。KU812细胞有一些嗜碱性细胞的标记(如Fc受体、碱性颗粒，生成组胺)，而淋巴标记阴性。

生长培养基RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

KU812人外周血嗜碱性白血病细胞 操作说明：

1)对于常温运输的细胞，收到细胞后，检查是否有运输问题，即细胞培养瓶或管是否破损，细胞培养液是否溢出。若没有运输问题，请75%酒精消毒后，保留封口膜，放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数：温度，湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后，细胞状态稳定后，即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系，A2780(人卵巢癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许，培养的三天内做细胞拍照记录，通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。

2)对于干冰运输的细胞，请取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。然后将其复苏培养，次日更换培养液。

KU812人外周血嗜碱性白血病细胞 注意事项：

1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保，证细胞的状态和生长速度。

3)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。