Hoechst33258染色液

产品货号：R23441

产品规格：10ml/50ml

产品简介：

Hoechst 33258也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258，分子式为C25H24N6O ·3HCl，分子量为533.88，CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也用于普通的细胞核染色、DNA染色。

Hoechst 33258的激发波长为346nm，发射波长为460nm，Hoechst 33258和双链DNA结合后，激发波长为352nm，发射波长为461nm。尚宝生物 Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。

产品组成：

自备材料：

1. 荧光显微镜

2. 蒸馏水

3. 微量移液器

4. PBS或生理盐水

操作步骤 (仅供参考) ：

（一）固定的组织细胞染色

1. 对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33258染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst 33258染色液，充分混匀。

2. 室温放置5～8min。

3. 轻轻吸除Hoechst 33258染色液。

4. 用无菌的 PBS 或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。

（二）活细胞染色

1. 取96、24、6孔板培养细胞至合适状态，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst 33258染色液，染液必须充分覆盖细胞。

2. 在适宜于细胞培养的条件下培养20～30min。

3. 轻轻吸除Hoechst 33258染色液。

4. 用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5. 进行荧光检测。

注意事项：

1. Hoechst 33258染色液的浓度适用于大多数常规染色的需要。

2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。

3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4. 避免反复冻融，否则容易失效。

5. Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司