大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒（CTAB沉淀法）

产品货号：11020

产品规格：50T/100T

产品简介：

大肠杆菌( Escherichia coli,E.coli)属于革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1~3微米周生鞭毛，能运动，无芽孢,能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴，几乎占粪便干重的1/3。获得DNA的量很高，但是纯度一般，但足够用于大多数分子生物学实验。

大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒CTAB沉淀法是简便的利用CTAB取大肠杆菌基因组DNA的试剂盒，其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白，CTAB沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与DNA分离，乙醇沉淀核酸获得基因组DNA，可进行酶切、PCR等下游实验。该试剂盒仅用于科研域，不用于临床诊断或治疗。

产品组成：

操作步骤：

1. 准备工作：取TE buffer，加至蛋白酶K中，充分混匀，配制成20mg/ml的白酶K溶液，可分装成小份，-20℃保存1年有效。

2. 取菌液置于EP管中，离心，弃上清液。再次加入1.5m菌液，重复该步骤一次。

3. 加入Eco裂解液和3μl白酶K溶液(20mg/ml)，充分混匀，37℃孵育1h。

4. 加入CTAB沉淀液，充分混匀，65℃孵育10min

5. 加入780μ l蛋白清除液，充分混匀，12000g离心5~10min

6. 转移上清至新EP管中，加入2倍体积的Eco漂洗液，混匀，－－20℃放置30min或过夜。

7. 13000g离心10min，弃上清液，加入70%乙醇洗涤沉淀。

8. 13000g离心10min，弃上清液，室温干燥DNA沉淀，加入100μ l或适量TE buffer溶解沉淀，-20℃保存。TE buffer体积越大，DNA浓度越低。

注意事项：

1. 用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜，裂解越好，收获量越大。

2. 为了您的安全和健康，请穿戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。

原创作者：上海尚宝生物科技有限公司