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牛奶样本到底要怎么处理

点击次数：454 发布时间：2020/7/15 17:58:25

牛奶样本到底要怎么处理

样本处理1：

取10ml牛奶放入离心管，加入10ml乙酸乙酯，超声震荡30min，然后4000g离心10min（如两相之间出现乳化层，则将样品瓶放在80℃的水浴中约5min，再离心）移取1ml乙酸乙酯层至另外试管中，60℃氮气流下蒸干，残留物用缓冲液2ml缓冲后备用，前处理过程约需2小时。

处理2：

取10ml牛奶10℃3500G离心10MIN，祛除上层脂肪，取5ml脱脂奶粉加入150微升17.2%亚铁氰化钾，出现沉淀，漩涡混合，然后加入150微升53.5%硫酸锌。再次漩涡混合。15摄氏度3500g离心10分钟，取上层清液用缓冲液1：2稀释待用，前处理过程所需1小时。

处理3：

取10ml牛奶，按照4000转每分离心15分钟，然后取中间层，如果是奶粉，那么按照1:4进行溶解后4000转每分离心15分钟。溶解液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）
常见样本处理方式也不忽略

1. 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2. 血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3. 尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

5. 培养细胞

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

1，对于样本要求保持鲜重

2，称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准

3，匀浆的比例选取10%，相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆

4，匀浆液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）

选用组织匀浆器或者碾钵进行组织匀浆！