人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒说明书

英文名称:People programmed death 1 (PD1) ELISA kit

货号:KS14551

规格：96T/48T

使用范围：仅限科研范围内使用

各种种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛、羊…
标本齐全：血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液、关节液、胸腔yi液等…
保存条件：2-8℃
实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒样本处理及要求

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

人程序性死亡1(PD1)ELISA试剂盒相关优质产品：

KS12554兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒

KS12555人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA试剂盒

KS12556人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒

KS12557人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒

KS12558人抗核因子抗体(ANF)ELISA试剂盒

KS12559大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒

KS12560牛载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒

KS12561小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒

KS12562大鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒

KS12563小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒

KS12564人雄激素受体(AR)ELISA试剂盒

KS12565兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒

KS12566人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒

KS12567大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

KS12016猪补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒

KS12569人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMVIgM)ELISA试剂盒

KS12570人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA试剂盒

KS12571人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒

KS12572人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA试剂盒

KS12573大鼠乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒

KS12574人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA试剂盒

KS12575人细菌性阴道病(BV)ELISA试剂盒

KS12576人硫酸褪黑色素(MS)ELISA试剂盒

KS12578人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒

KS12579小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

KS12580人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒

KS12581大鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒

KS12582人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒

KS12583小鼠抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒

KS12584人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒

KS12585小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒

KS12586人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒

KS12587小鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒

KS12588小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒

KS12589人变肾上腺素(MN)ELISA试剂盒

KS12590小鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒

原创作者：上海科顺生物科技有限公司