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组织胞浆菌通用PCR试剂盒

点击次数:271 发布时间:2019/5/6 8:55:38
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高*
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产品及特点组织胞浆菌(Histoplasm spp)会引起组织胞浆菌病,是一种在世界范围内广泛流行的传染病,尤其是以婴幼儿和老年人多见,男性发病率高于女性,临床表现有原发性肺部感染、播散性感染等,原发性肺部感染常表现为发热、头疼、全身不适和干咳,严重者会出现低氧血症和呼吸衰竭,播散性感染常有发热、体重下降、全身不适、肝脾肿大等症状,罕有伴发肺病变等症状,该细菌的感染对人体健康造成严重损害,因此快速检测组织胞浆菌通用具有重要意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增组织胞浆菌通用。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分成 份编号十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0908051 mL(亮黄盖)
超纯水1009351 mL(蓝色)
组织胞浆菌通用PCR引物混合液13-78400yw100 μL(白盖)
组织胞浆菌通用PCR阳性对照13-78400pc100 μL(黄盖)
天净沙DNA释放剂试用装13098250次(试用装)
使用手册13-78400sc1份
运输及保存低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂样品DNA。
使用方法一、样品DNA的制备
1.如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂,本产品的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。其使用手册可从本公司网站www.tiandz.com通过搜索产品名称天净沙DNA释放剂或产品编号130982下载。
二、设置PCR反应(40 μL体系)
3.对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成分N+2个
样品管PCR阴性对照PCR阳性对照
PCR MagicMix 3.0 各20 μL20 μL20 μL
组织胞浆菌通用 PCR引物混合液各2 μL2 μL2 μL
N+2个样品DNA模板各18 μL--
样品制备阴性对照-18 μL-
样品制备阳性对照--18 μL
4.按下表设置PCR反应:
过程温度时间
预变性94℃5 min
PCR反应
(35个循环)94℃20 sec
50℃20 sec
72℃30 sec
最后延伸72℃10 min
三、电泳检测
5.取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
关联产品组织胞浆菌通用可视化LAMP扩增试剂盒

原创作者:上海雅吉生物科技有限公司

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