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HIV-1 前病毒PCR 试剂盒
点击次数:301 发布时间:2019/4/25 8:51:54
商家名片
高*
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产品及特点人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患者血浆中病毒RNA 水平一直以来是评判抗病毒
治疗效果或预测疾病进展的重要指标。但是,经抗病毒治疗后血浆HIV-1RNA 已达到基
线水平感染者的血液、精液或淋巴结中仍可以检测到HIV-1原病毒DNA 的存在, 构成
病毒储藏库,对清除HIV-1病毒构成严重阻碍。所以在病毒载量已经检测不到的情况
下,HIV-1原病毒DNA 水平可以作为除CD4+T细胞计数和病毒载量之外的另一标志
物。本产品就是针对此需求而建立的一种检测HIV-1原病毒DNA 的PCR 检测方法,该
种方法还可用于HIV-1病毒储藏库中HIV-1原病毒DNA 的检测。本试剂盒具有下列特
点:
1. 根据HIV-1 LTR 基因设计的针对HIV-1 原病毒的PCR 引物,专一性强。
2. 即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
3. 试剂盒有阳性对照,别于区分真假阳性。
4. 本试剂盒足够50 次40μL 反应体系的常规PCR。
5. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。


运输及保存低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂DNA 模板。
使用方法一、样品DNA 的制备
1. 如果有N 个样品,必须设置N+2 个样品提取,多出的一个是PC(样品制备阳性
对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL 本试剂盒提供的PCR
阳性对照的10000 倍稀释液作为PC,但需要加上一定量的水使样品总体积跟每
次制备要求的总体积一样(参考所选用DNA 提取试剂盒手册),如果每次制备需
要200μL 样品,则加上水后的PC 起始总体积也必须是200μL。PC 制备得到的
样品为PC 样品。用水作为NC,制备得到的样品为NC 样品。
2. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数DNA 提取试剂盒兼容。
也可以选购本公司的相关产品。本试剂盒免费赠送50 次免DNA 提取的天净沙
DNA 释放剂,其使用手册可从本公司网站www.tiandz.com 通过搜索产品名称天
净沙DNA 释放剂或产品编号130982 下载。
二、设置PCR 反应(40 μL 体系)
3. 对N+2 个样品,在PCR 时需要增加一个PCR 阳性对照和一个PCR 阴性对照,
故需要设置N+4 个反应。在N+4 个PCR 管中分别加入下列成分,其中PCR 阳性
对照的10000 倍稀释液来于第1 步:
成分
N+2 个PCR 阴性PCR 阳性
样品管对照对照
PCR MagicMix 3.0 各20 μL 20 μL 20μL
HIV-1前病毒PCR 引物混合液各2 μL 2 μL 2 μL
N+2个样品(包括PC和NC) 各18 μL - -
超纯水- 18 μL -
PCR阳性对照10000倍稀释液- - 18 μL
4. 按下列PCR 参数进行PCR 扩增:
三、电泳分析
5. 取10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR 产物。本产品提供的PCR Mix 在扩增结
束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR 产物长度为
128bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对
没有扩增产物的样品,可以稀释10 倍后重复PCR 扩增以排除PCR 抑制剂的感
染。
关联产品HIV-1 原病毒可视化LAMP 试剂盒(CAT#:16-22700)
20180612ll
原创作者:上海雅吉生物科技有限公司



