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Caco-2人结直肠腺癌细胞 含STR鉴定
产品名称：Caco-2人结直肠腺癌细胞 含STR鉴定
特点：细胞代数为4代以内，细胞耐药倍数8倍以上；
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！
注：耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法基本一致，只是在培养中会加药维持筛选压力
Caco-2人结直肠腺癌细胞 含STR鉴定特性
1） 来源：肿瘤组织
2） 含量：>1x106 个/mL
3） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
一、组成：
| 组份 | 数目 |
| 细胞 | 1 T-25瓶 |
| 细胞说明书 | 一份 |
四、注意事项：
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察，大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常，继续培养，剩余漂浮的细胞可以去掉；若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力，并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片，记录细胞状态，如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题，超过时间我段，本公司则默认细胞状态良好，不免费对后续细胞状态问题进行售后。
做细胞实验的同学看过来。
选择上海琛艺生物细胞有3个理由：
1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞之一;
2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;
3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验，效果更佳。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4 . 客户收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议客户冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
3） 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
细胞培养常见问题及解决方法
| 问题 | 原因 | 解决方案 |
| 细胞生长缓慢 | 生长培养基使用不当 | 按照生产商的建议，使用相应的预热生长培养基。 |
| 生长培养基中血清质量差 | 使用其他批次血清。 | |
| 传代操作不当 | 按照生产商的建议消化时间及传代比例进行操作。 | |
| 换液过于频繁 | 降低换液频率，参考生产商推荐的换液频率。 | |
| 细胞传代次数过多 | 使用传代次数较少的健康细胞。 | |
| 细胞生长超过汇合状态 | 哺乳动物细胞传代应在细胞处于对数期、未达到汇合状态时进行，建议细胞密度达 80-90%传代。 | |
| 细胞被支原体污染 | 将细胞、培养基和试剂丢弃；新取一只冻存细胞，并且使用新的培养基和试剂。 | |
| 细胞复苏存活率低 | 细胞冻存不当 | 新取一只冻存细胞，并储存在液氮中。将细胞储存在液氮中，直至复苏。 |
| 自行制备的冻存细胞无活性 | 将细胞按照生产商推荐的密度冻存。 | |
| 制备冻存细胞时使用传代次数少的细胞。 | ||
| 严格按照生产商推荐的操作程序冻存细胞。请注意本手册推荐的冷冻程序是冻存细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。 | ||
| 新取一只冻存细胞。 | ||
| 细胞复苏方法不当 | 严格按照生产商推荐的操作程序复苏细胞。请注意本手册推荐的解冻程序是复苏细胞的一般流程，只能作为指导原则使用。 | |
| 确保冷冻细胞解冻迅速，接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。 | ||
| 复苏培养基使用不当 | 使用生产商推荐的培养基。确保培养基使用前已经预热。 | |
| 细胞稀释过度 | 按照生产商的建议，将解冻后的细胞高密度接种，以改善复苏效果。 | |
| 处理细胞时动作不够轻柔 | 冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影 响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外)，也不要高速离心细胞。 | |
| 冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光 | 如果未避光储存，冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质；新取一只冻存保护剂，重新冻存细胞。 |
★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料直接call，对您造成的不便还请见谅！
★注：如运输过程中导致细胞污染或者死亡，我们将无条件补发
收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
最后，通过低温保藏储备一些细胞，以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象，或常规检测呈阳性结果，那么最可靠的补救措施是扔掉所有培养物，清洁培养箱和超净台，一切从头开始。当然，你得确保储备的细胞是不含支原体的。
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