睿信生物 小反刍兽疫抗原包被酶标板

泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学域。睿信生物拥有完善的技术服务团队，严格的技术服务流程，获得客户的一致好评。 我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。

一、夹心法根据操作步骤又分为一步法、两步法、三步法，三者之间的区别归纳如下：

二、ELISA竞争法和夹心法的区别：

竞争法（competitive ELISA）：
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，后的显色也愈浅。

优点：适用于小分子抗原，数据再现性很高。

缺点：整体的敏感性和特异性都较差。

竞争法示意图：

夹心法（sandwich ELISA）：

被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

优点：高灵敏、高特异性，抗原无须事先纯化。

缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

传统两步法示意图：

睿信®一步法示意图：

竞争法和夹心法的相同点：两种方法都是检测抗原物质。

不同点：竞争法是用于检测小分子抗原物质，只有一个反应位点，没法用夹心法方法检测。而大分子抗原更适用于夹心法（也可以用竞争法），因为夹心法实验结果特异性和灵敏度更好。

注意：不同物质的适用原理可能不同，所以并没有说竞争法的一定比夹心法做的结果好，同样夹心法的也不一定比竞争法的结果好。我根据不同项目推荐佳适用方法的盒子。

三：即用型标准品（稀释好的液体标准品）和高浓度单试剂标准品（粉剂标准品）的优劣势

即用型：

优势：使用更加方便，拆开即用不需要再另外稀释，使用线性会更好

劣势：保存时间比较短，稳定性容易受保存条件和时间的影响

粉剂标准品：

优势：保存时间更长，试剂稳定性更好，可根据需求配置自己的需要的标准浓度

劣势：需要自己稀释线性浓度，操作比较麻烦，稀释线性容易出现问题

试剂盒限制性

1、 仅供科研使用，不得用于临床诊断。

2、 在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。

3、 跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。

4、 使用试剂盒配套的样品稀释液。

5、 如果样本值高于高标准品浓度值，请将样本适当稀释后，再重新测定。

6、 待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测，请排出该因素。

7、 通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。

技术提示

1、 混合蛋白溶液时，避免起泡。

2、 加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，避免交叉污染。

3、 合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。

4、 使用自动洗板机时，加入一个30浸泡的步骤，可以提高检测精度。

5、 底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色，代表底物溶液已经失效，不得使用。

6、 终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物，会瞬间变为黄色。

7、 实验中，用剩的板条，应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

8、 所有液体组分，使用充分摇匀，严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。

试剂盒组分与保存未开封的试剂盒保存在2-8度，不得使用过期试剂盒。

校准品浓度依次为：200、 100、 50、 25、 12.5、 6.25 ng/mL。

其他用品

1、 酶标仪（450nm）

2、 精密移液器及一次性吸头

3、 蒸馏水

4、 洗瓶或者自动洗板机

5、 37℃水浴锅或恒温箱

6、 500ml量筒

生物安全

1、 检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。

2、 试剂盒的液体组分中，含有proclin-300防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾与皮肤接触。

3、 底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。

4、 戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。