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人肝永生化细胞；THLE-3培养
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更新日期：2025/12/1 21:22:49
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
陈**
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相关标签：ＡＴＣＣ细胞
详细内容
人肝永生化细胞；THLE-3培养冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
细胞名称 人肝永生化细胞；THLE-3培养
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)细胞系是正常肝细胞用SV40大T抗原转染得到。 将含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中生产病毒。 THLE-2 ａnd THLE-3表达正常成人肝上皮细胞特征性的表型。 当注射到无胸腺裸鼠中时，它们不成瘤，具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白。 THLE-2 ａnd THLE-3将benzo[a]pyrene, N-nitrosodimet
培养条件 Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培养基(目录号CC3170)。 套装包含了500毫升基本培养基及分别冻存的添加剂，我们不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine。
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人肝永生化细胞；THLE-3培养细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
人肝永生化细胞；THLE-3培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人肝永生化细胞；THLE-3培养对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人肝永生化细胞；THLE-3培养注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
CFN97071http://www.chemfaces.com/natural/4-Hydroxybenzyl-alcohol-CFN97071.html623-05-24-Hydroxybenzyl alcoholPhenols> 95%C7H8O2124.1 100mg
CFN97135http://www.chemfaces.com/natural/N-trans-Feruloyltyramine-CFN97135.html66648-43-9N-trans-FeruloyltyraminePhenylpropanoids> 95%C18H19NO4313.4 5mg
CFN97136http://www.chemfaces.com/natural/Ethyl-caffeate-CFN97136.html66648-50-8Ethyl caffeatePhenylpropanoids> 98%C11H12O4208.2 20mg
CFN97160http://www.chemfaces.com/natural/Trifolirhizin-CFN97160.html6807-83-6TrifolirhizinFlavonoids>=98%C22H22O10446.4 20mg
CFN97172http://www.chemfaces.com/natural/Sophoridine-CFN97172.html6882-68-4SophoridineAlkaloids>=98%C15H24N2O248.4 20mg
CFN97181http://www.chemfaces.com/natural/8-O-Acetylharpagide-CFN97181.html6926-14-38-O-AcetylharpagideIridoids>=98%C17H26O11406.4 20mg
CFN97196http://www.chemfaces.com/natural/2-Hydroxy-5-methoxyacetophenone-CFN97196.html705-15⁻⁷2＇-Hydroxy-5＇-methoxyacetophenonePhenols> 95%C9H10O3166.2 100mg
CFN97218http://www.chemfaces.com/natural/p-Coumaric-acid-ethyl-ester-CFN97218.html7362-39-2p-Coumaric acid ethyl esterPhenylpropanoids> 98%C11H12O3192.2 100mg
CFN97225http://www.chemfaces.com/natural/8-Geranyloxypsoralen-CFN97225.html7437-55-08-GeranyloxypsoralenCoumarins> 95%C21H22O4338.4 20mg
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0018吐温20/吐混20/聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯/聚乙氧基月桂酸清凉茶醇/聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸酯/聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯/乳化剂T-20/Tween 20CP500毫升9005-64-5RT
Amersco0777试剂级500毫升
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，蛋白生物学级，10%10毫升*5pk
中文名称： 吐温20
其他中文名称： 吐混20；聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯；聚乙氧基月桂酸清凉茶醇；聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸酯；聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯；乳化剂 T-20
英文名称： Tween 20
其他英文名称： Polyoxyethylene sorbitan monolaurate
产品规格： CP
包装：500毫升
产品规格： 试剂级
包装：500毫升
CAS号：9005-64-5
分子式：C18H34O6·(C2H4O)n
级别：CP
羟值 ：90～108KOHmg/g
酸值：≤2.0KOHmg/g
皂化值：40～50KOHmg/g
重金属：≤0.001%
水分：≤3.0%
级别：Reagent Grade
Hydroxyl Number ：96～108
人肝永生化细胞；THLE-3培养灼烧残渣：≤2.5%
性状：黄色油状液体。微有脂肪气味，味苦。能溶于水，稀酸稀碱及多数有机溶剂，不溶于植物油及矿油。黏度约400mPa.s。亲水亲油值HLB16.7。闪点：>149℃；密度：1.106；沸点：100℃；折射率：1.4685-1.4715
用途：生化研究。非离子型表面活性剂。气相色谱固定液(最高使用温度120℃)分离分析挥发油、脂肪酸酯、醇、酮和卤化物。水溶性乳化剂。加溶剂。纺织工业用抗静电剂和纤维润滑剂
保存：RT
ＡＴＣＣ细胞
