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人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤
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更新日期：2025/12/1 21:22:49
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
陈**
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相关标签：ＡＴＣＣ细胞
详细内容
公司是最专业的ATCC细胞供应商，提供人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤的报价，咨询，称技术服务，欢迎来电咨询选购。人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤 复苏操作要点：
细胞名称 人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤
形态特性 上皮样；多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 293细胞是由腺病毒5型（Ad5）DNA转化原代人胚肾获得的永久细胞系。该细胞对人的腺病毒尤其敏感，能受纳高水平的腺病毒DNA。含有5型腺病毒的基因，且能高效表达。此外，293细胞的染色体数目以亚三倍体（hypotriploid）占多数，主流数为64条（30%），高倍体为4.2%。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C35
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤 操作步骤：
人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0017-1十二烷基二甲基乙基溴化铵/十二烷基乙基二甲基溴化铵高纯，98%5克68207-00-1RT
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，/EDDAB25克
中文名称： 十二烷基二甲基乙基溴化铵
其他中文名称： 十二烷基乙基二甲基溴化铵
英文名称： EDDAB
其他英文名称： Dimethyldodecylethylammonium bromide；Dodecylethyldimethylammonium bromide
产品规格： 高纯，98%
包装：25克/100克
CAS号：68207-00-1
C16H36BrN=322.37
级别：High purity grade
含量：≥98.0%
重金属：≤5ppm
PH：6.0～8.0
人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤水溶性（5%，H2O）：无色透明
性状：粉末，熔点185-188℃
用途：生化研究。应用于催化剂,乳化剂,消毒剂,杀菌基,抗静电剂等等
保存：RT
人原胚肾转化细胞；293 Ad5操作步骤培养温馨提示：
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