技术文章
雅心重组抑肽酶（RTI16）与sigma提取抑肽酶（A1153）比较
点击次数：622 发布时间：2017/5/4 17:06:20
商家名片
*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******592
- 手机:
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
雅心重组抑肽酶（RTI16）与sigma提取抑肽酶（A1153）比较
实验目的：比较雅心重组抑肽酶（货号RTI16,批号:RTI161101）与sigma抑肽酶（货号A1153, 批 号:SLBP2656V ）在比活性、吸光度、酸度、纯度等方面的异同。
实验方法：
1、蛋白含量、比活性、吸光度测定，酸度检测
称取一定量的两种酶的粉末，分别用纯水溶解，配制成2.5mg/ml的酶液 ，按照吸光系数法测定蛋白含 量，其中A280nm，1cm（1mg/ml）=0.84，活性测定按照SOP操作，计算比活性。将酶液稀释成 3EPU/ml，277nm下测定吸光度，要求不大于0.8,测定酶液的酸度。
2、HPLC纯度测定
①选择分子筛分析柱为TSK-GEL G2000SWXL。
②该柱子的pH范围为2.5-7.5，速度范围为0.5-1.0ml/min（最高可为1.2），温度范围10-30℃，洗脱液盐 浓度小于0.5M。
③检测波长280nm。
④根据以上两点设计方法如下表：
⑤其他方法按照液相SOP进行操作。
⑥上样量均是20ug。
⑦样品处理：纯水溶解冻干粉。
实验结果：
1、蛋白含量、比活性、吸光度和酸度
2、HPLC纯度
①雅心重组抑肽酶（RTI161101）
②sigma提取抑肽酶（货号A1153，lot number:SLBP2656V）
实验结论：
1.两种蛋白在蛋白含量、比活性、吸光度和酸度方面都基本一致，其中雅心重组抑肽酶（RTI161101）比活 性略高于sigma抑肽酶（A1153）。
2.HPLC纯度：雅心重组抑肽酶（RTI161101）比sigma抑肽酶（A1153）峰形更集中，两者纯度均为 100%。
实验目的：比较雅心重组抑肽酶（货号RTI16,批号:RTI161101）与sigma抑肽酶（货号A1153, 批 号:SLBP2656V ）在比活性、吸光度、酸度、纯度等方面的异同。
实验方法：
1、蛋白含量、比活性、吸光度测定，酸度检测
称取一定量的两种酶的粉末，分别用纯水溶解，配制成2.5mg/ml的酶液 ，按照吸光系数法测定蛋白含 量，其中A280nm，1cm（1mg/ml）=0.84，活性测定按照SOP操作，计算比活性。将酶液稀释成 3EPU/ml，277nm下测定吸光度，要求不大于0.8,测定酶液的酸度。
2、HPLC纯度测定
①选择分子筛分析柱为TSK-GEL G2000SWXL。
②该柱子的pH范围为2.5-7.5，速度范围为0.5-1.0ml/min（最高可为1.2），温度范围10-30℃，洗脱液盐 浓度小于0.5M。
③检测波长280nm。
④根据以上两点设计方法如下表：
| 方法 | pH | 流速ml/min | 温度℃ | 洗脱液 |
| 分子筛 | 5.8 | 1 | 25 | 0.1M HAC-NaAC，pH5.8，0.1M NaCl |
⑥上样量均是20ug。
⑦样品处理：纯水溶解冻干粉。
实验结果：
1、蛋白含量、比活性、吸光度和酸度
| 蛋白含量 | 比活性EPU/mg | 吸光度 | 酸度pH | |
| 雅心RTI | 72% | 3.71 | 0.505 | 5.0-7.0 |
| Sigma抑肽酶 | 76.9% | 3.56 | 0.526 | 5.0-7.0 |
①雅心重组抑肽酶（RTI161101）
②sigma提取抑肽酶（货号A1153，lot number:SLBP2656V）
实验结论：
1.两种蛋白在蛋白含量、比活性、吸光度和酸度方面都基本一致，其中雅心重组抑肽酶（RTI161101）比活 性略高于sigma抑肽酶（A1153）。
2.HPLC纯度：雅心重组抑肽酶（RTI161101）比sigma抑肽酶（A1153）峰形更集中，两者纯度均为 100%。
原创作者：上海雅心生物技术有限公司
