规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
细胞介绍
MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。它是正常二倍体细胞系,46,XY核型。模式染色体数为46,概率为70%。
细胞特性
1)来源:肺
2)形态:成纤维细胞
3)含量:>1x106 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
人胚肺成纤维细胞上海直销操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
p35人巨细胞病毒UL23抗体0.1ml
P38 MAPK人巨细胞病毒UL23抗原0.1ml
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14人巨细胞病毒UL49蛋白抗体0.2ml
p400人巨细胞病毒UL49蛋白抗体0.2ml
P450 1A2/CYP1A2人巨细胞病毒UL49抗原0.1ml
p47人巨细胞病毒单克隆抗体0.1ml
p47-phox人巨细胞病毒抗体0.1ml
P4HB人聚集蛋白0.1ml
P4HTM人卷曲蛋白80.1ml
P51A人军团菌抗体IgA0.1ml
P53人军团菌抗体IgG0.1ml
p53 (FL-393)人军团菌抗体IgM0.1ml
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit人军团菌抗原0.1ml
p53 activated protein 2人抗BB抗体0.1ml
p53 apoptosis effector related to PMP22人抗BP180抗体0.1ml
p53 DINP1人抗DNA酶B抗体0
P53 ELISA Kit人抗EB病毒抗体0.1ml
P53 protein(wt-p53)人抗IgA抗体0.1ml
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit人抗IgE受体抗体0.2ml
p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit人抗IVIgG抗体0.1ml
P53(wt-p53)人抗Ku抗体0.1ml
P53(wt-p53)人抗Mi2抗体0.1ml
兔脂蛋白α(Lp-α)免疫试剂盒Chicken Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit
兔中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)免疫试剂盒Chicken vitellogenin,VTG ELISA kit
兔转化生长因子β2(TGFβ2)免疫试剂盒Chicken heparan sulfate,HS ELISA Kit
人胚肺成纤维细胞上海直销兔转化生长因子β3(TGFB3)免疫试剂盒Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit
兔子4-羟基壬烯酸(HNE)免疫试剂盒Chicken Phospholipase Cγ1,PLCγ1 ELISA Kit
兔子6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)免疫试剂盒Chicken Phospholipase C,PLC ELISA Kit
兔子8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫试剂盒Chicken Phosphoenolpyruvate carboxykinase,cytosolic[GTP](PCK1)ELISA kit
兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)免疫试剂盒Chicken Granulocyte Specific Antinuclear Antibody,GS-ANA ELISA Kit
兔子Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)免疫试剂盒Chicken Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
兔子Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)免疫试剂盒Chicken granulocyte colony-stimulating factor receptor,G-CSFR ELISA Kit
兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)免疫试剂盒Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit
兔子Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)免疫试剂盒Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit
兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒Chicken soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit
兔子Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒Chicken anti-human IgM antibody ELISA kit
兔子Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒Chicken anti-human IgG antibody ELISA kit
兔子Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)免疫试剂盒Chicken anti-human IgA antibody ELISA kit
兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)免疫试剂盒Chicken Anti-Thrombin Ⅲ antibody,AT-Ⅲ Ab ELISA Kit
兔子Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)免疫试剂盒Chicken anti-streptolysin O(ASO)antibody(IgM)ELISA Kit
兔子Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒Chicken anti-streptolysin O(ASO)antibody(IgG)ELISA Kit
兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫试剂盒Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit
兔子CD34分子(CD34)免疫试剂盒Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit
兔子C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒Chicken Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
兔子Dickkopf 1(DKK1)免疫试剂盒Chicken Calcitonin,CT ELISA Kit