一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次

一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa试剂盒Rat nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit96T/48T

大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 Rat inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit96T/48T

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒Rat Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit96T/48T

大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit96T/48T

大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒Rat heat shock protein 90,hSP-90 ELISA Kit96T/48T

大鼠热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)ELISA试剂盒Rat heat shock protein 70,hSP⁻⁷0 ELISA Kit96T/48T

大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit96T/48T

大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒Rat heat shock protein 20,hSP-20 ELISA Kit96T/48T

大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒Rat Cyclin-D3 ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒Rat Cyclin-D2 ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒Rat Cyclin-D1 ELISA Kit96T/48T

大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒Rat myelin basic protein,MBP ELISA Kit96T/48T

大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit96T/48T

大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit96T/48T

大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit96T/48T

大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒Rat prostate specific antigen,PSA ELISA Kit96T/48T

大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒Rat ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit96T/48T

大鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit96T/48T

大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit96T/48T

大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit96T/48T

大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒Rat Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit96T/48T

大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit96T/48T

大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒Rat Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit96T/48T

大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒Rat Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit96T/48T

大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 96T/48T

大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit96T/48T

大鼠水通道蛋白2(AQP-2) ELISA试剂盒 Rat Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit96T/48T

大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit96T/48T

一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒Rat Inhibin,INH-A ELISA Kit96T/48T

大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒Rat Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit96T/48T

大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit96T/48T

大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit96T/48T

大鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit96T/48T

大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒Rat High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒Rat pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit96T/48T

大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒Rat Endothelial lipase,EL ELISA Kit96T/48T

大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒Rat carbonic anhydrase,CA ELISA Kit96T/48T

大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒Rat calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit96T/48T

大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒Rat Motilin,MTL ELISA Kit96T/48T

大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit96T/48T

大鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒Rat Somatostatin,SS ELISA Kit96T/48T

大鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit96T/48T

大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit96T/48T

大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒Rat Myosin,MYS ELISA Kit96T/48T

大鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒Rat Desmin,Des ELISA Kit96T/48T

大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒Rat major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit96T/48T

大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit96T/48T

大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit96T/48T

大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA⁻⁷8/CXCL5)ELISA试剂盒Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA⁻⁷8 ELISA Kit96T/48T

大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit96T/48T

大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒Rat neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit96T/48T

大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit96T/48T

大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒Rat Gelsolin ELISA Kit96T/48T

大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit96T/48T

大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit96T/48T

大鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit96T/48T

大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit96T/48T

大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit96T/48T

大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T