SDS-PAGE 上样液，5×1mL

SDS-PAGE 上样液，5×1mL原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
SDS-PAGE 上样液，5×1mL一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
SDS-PAGE 上样液，5×1mL三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。

猴胰岛素(INS)elisa试剂盒 Monkey Insulin,INS ELISA Kit96T/48T

猴子巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit96T/48T

骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒Camel Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit96T/48T

骆驼脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒Camel lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T

骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒Camel Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 96T/48T

骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒Camel transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T

马生长激素(GH)ELISA试剂盒Equine growth hormone,GH ELISA Kit96T/48T

马主要组织相容性复合体(MHC/ELA)ELISA试剂盒Equine major histocompatibility complex,MHC/ELA ELISA Kit 96T/48T

马免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒Equine Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T

马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒Equine amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit96T/48T

马β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒Equine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit96T/48T

山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒Goat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T

山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA Kit96T/48T

山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit96T/48T

山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T

山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 Goat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T

山羊白介素10(IL-10)ELISA试剂盒Goat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T

山羊β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒Goat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T

SDS-PAGE 上样液，5×1mL山羊丙酮检测(acetone)ELISA试剂盒 Goat acetone ELISA Kit 96T/48T

鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒Deer Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit 96T/48T

鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒Deer Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T

鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒Deer Serum amyloid A,SAA ELISA Kit96T/48T

鹿红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒Deer erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 96T/48T

鱼孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒 PROG ELISA Kit 96T/48T

鲑鱼降钙素(SCT)ELISA试剂盒Salmon calcitonin,SCT ELISA Kit96T/48T

鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒Fish Thyroxine,T4 ELISA Kit96T/48T

鱼雌二醇（E2)ELISA试剂盒E2 ELISA 96T/48T

鱼促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒ACTH ELISA Kit96T/48T

鱼雌激素（E）ELISA试剂盒E ELISA Kit 96T/48T

鱼促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒FSH ELISA Kit96T/48T

鱼促黄体激素（LH）ELISA试剂盒LH ELISA Kit 96T/48T

鱼磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA试剂盒AMPK ELISA Kit 96T/48T

鱼卵黄高磷蛋白（PV）ELISA试剂盒PV ELISA Kit96T/48T

鱼类主要组织相容性复合体（MHC）ELISA试剂盒MHC ELISA Kit96T/48T

鲑鱼补体蛋白3（C3）ELISA试剂盒C3 ELISA Kit96T/48T

鲑鱼补体蛋白4（C4）ELISA试剂盒C4 ELISA Kit 96T/48T

鱼类白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒IL-1α ELISA Kit 96T/48T

鱼类白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒IL-1β ELISA Kit96T/48T

鲤鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒VTG ELISA Kit96T/48T

鱼类促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒GnRH ELISA Kit 96T/48T

鱼类三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit96T/48T

鱼类皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒Fish Cortisol ELISA Kit96T/48T

鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 96T/48T

鱼骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit96T/48T

裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒Nude mouse cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit96T/48T

裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 Nude mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit 96T/48T

裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒Nude Mouse Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 96T/48T

裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒Nude Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit 96T/48T

仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA K96T/48T

仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T

仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 96T/48T

仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒Hamster Cathepsin K,cath-K ELISA Kit 96T/48T

豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit96T/48T

豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T

豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit96T/48T

豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒Guinea pig Lebtospira IgG ELISA Kit96T/48T

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit 96T/48T

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒Guinea pig ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit96T/48T

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA Kit96T/48T

豚鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒guinea pig nitric oxide,NO ELISA Kit96T/48T