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TCEP 盐酸膦1g
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
TCEP 盐酸膦1g二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
TCEP 盐酸膦1g原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
鹿特定基因序列(Deer)核酸检测试剂盒48T
鱼特定基因序列(Fish)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
鱼特定基因序列(Fish)核酸检测试剂盒48T
动物源性成分(18S)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
动物源性成分(18S)核酸检测试剂盒48T
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒48T
蟹特定基因序列(Cytb)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
蟹特定基因序列(Cytb)核酸检测试剂盒48T
马特定基因序列(Hor)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
TCEP 盐酸膦1g马特定基因序列(Hor)核酸检测试剂盒48T
植物源性成分(RBCL)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
植物源性成分(RBCL)核酸检测试剂盒48T
木瓜特定基因序列(Papaya)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
木瓜特定基因序列(Papaya)核酸检测试剂盒48T
大豆特定基因序列(Lectin)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
大豆特定基因序列(Lectin)核酸检测试剂盒48T
玉米特定基因序列(IVR)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
玉米特定基因序列(IVR)核酸检测试剂盒48T
马铃薯特定基因序列(PATA)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
马铃薯特定基因序列(PATA)核酸检测试剂盒48T
番茄特定基因序列PG)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T
番茄特定基因序列(PG)核酸检测试剂盒48T
Kovacs氏靛基质试剂10mLx1
V-P甲、乙液试剂10mLx2
1%亚碲酸钾溶液5mL/支x10
亮绿琼脂250(g)
平板计数琼脂（PCA)250(g)
平板计数琼脂（PCA)1000(g)
假单胞分离琼脂250(g)
假单胞分离肉汤250(g)
假单胞F琼脂250(g)
假单胞P琼脂250(g)
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB)250(g)
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB)1000(g)
EC肉汤250(g)
EC肉汤1000(g)
伊红美蓝琼脂（EMB)250(g)
伊红美蓝琼脂（EMB)1000(g)
营养肉汤（NB）250(g)
营养肉汤（NB）1000(g)
营养琼脂（NA)250(g)
营养琼脂（NA)1000(g)
乳糖胆盐发酵培养基250(g)
乳糖胆盐发酵培养基1000(g)
乳糖复发酵培养基（乳糖发酵培养基）250(g)
乳糖复发酵培养基（乳糖发酵培养基）1000(g)
去氧胆酸盐琼脂（DC）250(g)
去氧胆酸盐琼脂（DC）1000(g)
赫氏培养基250(g)
赫氏增菌液250(g)
溶血琼脂基础250(g)
龙胆紫血液琼脂基础250(g)
菌种培养基250(g)
四环素检定琼脂250(g)
MR-VP培养基250(g)
察氏培养基250(g)
结晶紫中性红胆盐琼脂VRBA250(g)
结晶紫中性红胆盐琼脂1000(g)
产毒培养基250(g)
西蒙氏枸橼酸盐琼脂250(g)
肠道菌计数琼脂（VRBDA)250(g)
菌种保存培养基250(g)
改良罗氏培养基基础250(g)
酸性L-J培养基基础250(g)
碱性L-J培养基基础250(g)
乳糖蛋白胨培养液250(g)
