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EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL
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更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
10143细菌总数显色培养基2000ml/瓶用于细菌总数测定，24h 内出结果， 细菌呈红色
101441 万 ml/瓶
10248TBX 显色培养基1000ml/瓶用于快速检测，24h 内出 结果，显蓝色
102495000ml/瓶
10250/大肠菌群显色培养基1000ml/瓶用于同时快速检测、大肠 菌群，24h 内出结果，蓝 紫色，大肠菌群橙红色
102515000ml/瓶
10252大肠菌群显色培养基 1000ml/瓶用于大肠菌群快速检测，24h 内出 结果，大肠菌群显蓝色
102535000ml/瓶
10326沙门氏菌显色培养基1000ml/瓶用于沙门氏菌快速检测，24h 内出 结果，沙门氏菌显紫红色
103275000ml/瓶
11409李斯特氏菌显色培养基1000ml/瓶用于李斯特氏菌快速检测，48h 内 出结果，李斯特氏菌显蓝色有不透 明晕环
114105000ml/瓶
10515弧菌显色培养基1000ml/瓶用于弧菌快速检测，副溶血性弧菌 显蓝色，菌显红色
105165000ml/瓶
10818球菌显色培养基1000ml/瓶用于球菌快速检测， 24h 内出结果，球菌显 蓝色
108195000ml/瓶
11124念珠菌显色培养基1000ml/瓶用于念珠菌快速检测，48~72h 内出 结果，白色念珠菌显绿色，克柔氏 念珠菌显粉紫色
111255000ml/瓶
11605大肠埃希氏菌 O157 显色培养基1000ml/瓶用于 O157 菌快速检测，O157 菌显 红色
116065000ml/瓶
11503阪崎肠杆菌显色培养基1000ml/瓶用于阪崎肠杆菌的分离，24h 内出 结果，阪崎肠杆菌显蓝绿色
12115尿道感染显色培养基1000ml/瓶用于临床样本中引起尿道感染微 生物的检测
10920mEI 琼脂基础1000ml/瓶用于水中肠球菌的检测和计数， 24h 内出结果，肠球菌显蓝色。每100ml 培养基中需添加 1 支 20904
10286/大肠菌群液体显色培养基1000ml/瓶用于同时快速检测、大肠 菌群，24h 内出结果，有 蓝色荧光，大肠菌群呈蓝色
10288改良 LMX 肉汤2 万 ml/瓶用于同时快速检测、大肠 菌群，24h 内出结果
11169霉菌和酵母菌显色培养基1000ml/瓶
10102磷酸盐缓冲液（pH7.2）250g/瓶用于样品稀释（GB、SN）
10135pH7.4 磷酸盐缓冲液（PBS）250g/瓶用于样品的稀释、制备（中国药典）
10136pH7.2 磷酸盐缓冲液250g/瓶0.03mol/L ，用 于 样 品制 备 和稀 释（国家消毒技术规范）
10137无菌检验用洗脱液250g/瓶含 PBS，用于样品的制备（国家消 毒技术规范）
10138胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS）250g/瓶用于样 品稀 释（国 家消 毒技 术规 范）
11018氯化钠胰蛋白胨稀释液250g/瓶用于样品的制备与稀释（SN）
10126蛋白胨-盐溶液 250g/瓶用于样品的稀释（NY）
12001Amies 运送培养基250g/瓶用于致病菌标本的采集、运输和保存
12002Cary-Blair 氏运送培养基250g/瓶用于致病菌标本的采集、运输和保存
12003Stuart 运送培养基250g/瓶用于致病菌标本的采集、运输和保存
12005改良运送培养基250g/瓶用于运送厌氧菌标本
EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL10139溴甲酚紫蛋白胨培养液250g/瓶用于灭菌与消毒鉴定试验（国家消毒 技术规范）
10122标准Ⅰ号营养琼脂 250g/瓶用于细菌培养，营养丰富，可做血琼 脂基础培养链球菌等苛养菌
10177标准Ⅰ号营养琼肉汤250g/瓶用于细菌培养，营养丰富
10128标准Ⅱ号营养琼脂 250g/瓶用于培养非苛氧的细菌，也用于奶制 品中细菌总数的测定
10129m-TGE 肉汤250g/瓶用于滤膜法测定奶制品中的菌落总 数
10131AC 肉汤250g/瓶用于常见微生物的培养和不含防腐 剂的样品的检测
101242216E 液体培养基250g/瓶用于海生细菌的增菌培养
10812胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）250g/瓶用于细菌的增菌、培养
11210Dey/Engley 中和肉汤基础250g/瓶用于化妆品样品的制备和卫生环境 中细菌的培养，每升培养基中需添加1 支 20204
10132Dey/Engley 中和琼脂基础250g/瓶用于卫生环境中微生物的培养，每升 培养基中需添加 1 支 20204
10301缓冲蛋白胨水（BPW）250g/瓶用于沙门氏菌、阪崎肠杆菌前增菌， 也可用于其它细菌的培养
10803豆粉琼脂血液250g/瓶每 100ml 培 养 基 中 添 加 5ml~10ml50701，配制成血琼脂平板，用于细 菌培养或溶血试验
10704哥伦比亚血琼脂基础250g/瓶广泛用于细菌，尤其是弯曲杆菌、链 球菌等苛养菌的培养，每 100ml 培养 基中添加 5ml~10ml 50701
11405血琼脂基础血液250g/瓶每 100ml 培 养 基 中 添 加 5ml~10ml50701，配制成血琼脂平板，用于细 菌培养或溶血试验
10805脑心浸出液肉汤（BHI）250g/瓶用于细菌的增菌和培养
10193脑心浸出液琼脂（BHIA）250g/瓶用于细菌尤其是苛养菌的培养
10204营养肉汤普通250g/瓶用于细菌的增菌、复壮等
11009硫乙醇酸盐流体培养基250g/瓶用于浑浊制品需氧菌无菌试验
10116溴甲酚紫葡萄糖肉汤250g/瓶用于低酸性罐头食品无菌检验
10117酸性肉汤250g/瓶用于酸性罐头食品无菌检验
10114溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基250g/瓶用于灭菌效果检验
118010.5%葡萄糖肉汤培养基250g/瓶用于无菌检查
