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钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液，10mg/mL10mL
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液，10mg/mL10mL二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液，10mg/mL10mL原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
11111玫瑰红钠琼脂培养基250g/瓶用于霉菌、酵母菌计数
11112酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基250g/瓶用于霉菌、酵母菌计数
11113沙氏葡萄糖液体培养基250g/瓶用于真菌培养和检测
11114沙氏葡萄糖琼脂培养基250g/瓶用于真菌培养和检测
111151%吐温 80-玉米琼脂培养基250g/瓶用于白色念珠菌产芽管试验，每500ml 培养基中添加 1 支 20204
11117沙氏液体培养基250g/瓶用于真菌增菌培养
11118沙氏琼脂培养基250g/瓶用于真菌计数培养
11119产毒培养基1000ml/瓶用于青霉和曲霉的产毒培养
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11122霉菌培养基250g/瓶用于霉菌培养
11123高盐察氏培养基250g/瓶用于霉菌总数的测定
11126酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂（YGC）250g/瓶用 于 霉 菌 酵 母 菌 的 分 离 和 计 数（ISO）
11127Candida Elective 琼脂250g/瓶用于食品中假丝酵母和酵母菌总 数的测定
11129DRBC 培养基250g/瓶用于食品中霉菌及酵母菌的分离 培养和计数
11130Wort 肉汤基础250g/瓶麦芽汁肉汤基础，用于真菌，特别 是酵母菌的 增菌培养 ，每 100ml 培养基中添加 0.25g21702
11131Wort 琼脂基础250g/瓶麦芽汁琼脂基础，用于真菌，特别 是酵母菌的计数，每 100ml 培养基 中添加 0.235g21702
11132M-绿色酵母菌和霉菌肉汤250g/瓶用于饮料中酵母菌和霉菌的检测
11133Littman 琼脂基础250g/瓶用于真菌的 分离培养 ，每 100ml培养基中添加 0.3g 链霉素
钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液，10mg/mL10mL11134沙氏 BHI 琼脂250g/瓶用于真菌的检测
11135BIGGY 琼脂250g/瓶用于念珠菌的分离和计数
11137曲霉素琼脂（AFPA）250g/瓶用于曲霉菌和寄生曲霉的分离培 养
11138TTC-沙保弱培养基250g/瓶用于真菌的培养和计数
11139霉菌液体培养基250g/瓶用于霉菌的增菌
11140沙堡琼脂培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验
11141沙堡液体培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验
11142无菌试验用真菌培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验
11144MEA 培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验
11145MBB 肉汤250g/瓶用于真菌杀灭试验
11173WL 营养肉汤250g/瓶用于啤酒和发酵产品中酵母菌和 细菌的培养
11146麦芽汁琼脂基础250g/瓶含 1.275%麦芽糖，不含氯霉素， 用于酵母菌和霉菌的培养，每升培 养基中添加 2.35g 甘油
11147麦芽汁肉汤250g/瓶含 0.6%麦芽浸粉，不含氯霉素， 用于霉菌和酵母菌的培养
10118麦芽浸膏汤250g/瓶含 1.5%麦芽浸粉，不含氯霉素， 用于酸性罐头食品无菌检验，也用 于霉菌和酵母菌的培养（GB）
11121麦芽汁琼脂培养基250g/瓶含 3%麦芽浸粉，不含氯霉素，用 于霉菌和酵母菌的分离和培养
11150桔汁琼脂（OSA）250g/瓶用于耐酸细菌的分离培养
11151桔汁肉汤（10 倍浓缩）250g/瓶用于耐酸细菌的培养
11155麦氏（Meclary）琼脂250g/瓶用于真菌培养
11156葡萄糖蛋白胨培养基250g/瓶用于真菌和腐生菌的检验
11157营养盐培养液250g/瓶用于抗菌性能试验，每升培养基中 添加 0.5g 吐温-80
11158营养盐琼脂培养基250g/瓶用于抗菌性能试验，每升培养基中 添加 0.5g 吐温-80
12151酵母碳源基础（YCB）250g/瓶用于通过氮源的利用对酵母菌进 行分类
12152酵母基础，无维生素250g/瓶用于通过维生素的利用对酵母菌 进行分类
12153酵母菌形态琼脂 250g/瓶用于酵母菌的形态学分类
12154酵母氮源基础（YNB）250g/瓶用于通过碳源的利用对酵母菌进 行分类
12155酵母氮源琼脂250g/瓶用于通过碳源的利用对酵母菌进 行分类
12156酵母氮源基础、无氨基酸 250g/瓶用于通过碳源和氨基酸的利用对 酵母菌进行分类
11159综合马铃薯培养基250g/瓶用于真菌培养
11162DG-18 琼脂基础250g/瓶用于霉菌酵母菌的计数，每升培养 基中添加 220g 甘油
11163改良 DG-18 琼脂基础250g/瓶用于霉菌酵母菌的计数，每升培养 基中添加 220g 甘油
11167葡萄糖蛋白胨肉汤250g/瓶用于霉菌、酵母菌检测(日本药典)
11168葡萄糖蛋白胨琼脂250g/瓶用 于 真 菌 的 检 测 ( 日 本 药 典 ) 。每 200ml 培养基中添加 1 支 21116 制 成含抗生素的葡萄糖蛋白胨琼脂
11170YM 肉汤250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的 培养
11171YM 琼脂250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的 培养
11172马铃薯蔗糖琼脂250g/瓶用于真菌的培养
10106哥伦比亚琼脂培养基250g/瓶用于梭菌的检验，每 100ml 培养 基中添加 1 支 20102
11003卵黄琼脂培养基250g/瓶用于梭菌的分离培养，每 100ml培养基中添加 2 支 21001
11006含铁牛奶培养基250g/瓶用于产气荚膜梭菌暴烈发酵试验
11008梭菌增菌培养基250g/瓶用于梭菌的增菌培养
11014产芽孢肉汤250g/瓶用于产气荚膜梭菌的芽孢试验
11015多价蛋白胨-酵母膏（PY）培养基250g/瓶用于产气荚膜梭菌培养
11017乳糖-明胶培养基250g/瓶用于产气荚膜梭菌的乳糖、明胶生 化试验
11020胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤（TPGYT 基础）250g/瓶用于肉毒梭菌增菌培养，需添加1:250 胰蛋白酶 51002
11021厌氧卵黄琼脂基础250g/瓶用于肉毒梭菌增菌分离，每 100ml培养基中添加 3 支 21001
11022明胶磷酸盐缓冲液250g/瓶用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的 制备
11023TSN 琼脂250g/瓶用于产气荚膜梭菌的选择性分离 和计数
11024TBB 培养基250g/瓶用于乳酪产品中梭菌的计数
11027强化梭菌鉴别琼脂（DRCA）250g/瓶用于食品和其它物质中梭菌的计 数和培养
11029强化梭菌培养基250g/瓶用于梭菌的培养
