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酵母蛋白酶抑制剂1mL
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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详细内容
酵母蛋白酶抑制剂1mL二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
酵母蛋白酶抑制剂1mL三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
酵母蛋白酶抑制剂1mL原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。
抗生素检定培养基1号（低PH） 250用于磺苄青霉素效价测定
抗生素检定培养基2号（高PH） 250用于林可霉素，克林霉素等效价测定
玫瑰红钠琼脂 250用于霉菌、酵母菌计数
普通琼脂斜面培养基(PH8.0-8.2) 250分离培养菌，麦迪霉素检定用
甘露醇高盐琼脂 250用于球菌的选择性分离培养
抗生素检定培养基4号 250用于两性霉素B等的效价测定
抗生素检定培养基6号 250用于粘菌素等的效价测定
抗生素检定培养基7号 250用于头孢噻肟钠等的效价测定
抗生素检定培养基8号 250用于去甲万古霉素等的效价测定
抗生素5号 250用于两性霉素B检定菌种培养
MUG培养基 100用于测定
真菌琼脂培养基 250用于无菌生长试验
磷酸盐葡萄糖胨水培养基 250用于甲基红试验
甲基红指示剂盒10ml*1用于甲基红试验配套试剂
胰蛋白胨水培养基 250用于靛基质试验
Kovacs氏靛基质试剂盒 10ml*2用于吲哚（靛基质）试验配套试剂
ASS 琼脂250用于磺胺类灵敏度试验(WHO方法)
AC肉汤250用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验(Alpha Biosciences方法)
酵母蛋白酶抑制剂1mL改良马丁液体培养基 250用于菌苗制造及生物制品霉菌无菌检验
改良马丁琼脂培养基 250用于生物制品霉菌无菌检验
营养琼脂（NA） 250细菌总数测定，细菌传代培养
四号琼脂基础 250用于菌的选择性分离，后加亚碲酸钾
SS 琼脂 250选择性培养基，用于沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离
伊红美蓝琼脂（EMB） 250弱选择性培养基，用于肠道菌的选择性分离
三糖铁琼脂（TSI） 250用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（葡萄糖，乳糖，蔗糖）
XLD 琼脂 250选择性培养基，用于志贺氏菌的选择性培养(FDA标准)
庆大霉素琼脂 250用于菌的分离培养
MH 肉汤（MHB） 250用于抗生素敏感试验
MH 琼脂（MHA） 250用于抗生素敏感试验
中国蓝琼脂 250弱选择性培养基，用于肠道致病菌的选择性分离
克氏双糖铁琼脂 250用于细菌复合生化试验（葡萄糖，乳糖）
血琼脂基础2号250供分离营养要求非常高的致病菌用，后加血液制成血平板
血液琼脂基础 250供分离营养要求较高的致病菌用，后加血液制成血平板
血液增菌培养基 250用于从血液中分离病原菌
氯化三苯四氮唑-沙保罗培养基 250用于分离真菌，酵母菌等
麦康凯琼脂 250用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
麦康凯琼脂(不含盐) 250用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
麦康凯琼脂2号 250用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
麦康凯琼脂3号 250用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
碱性琼脂平板 250用于分离菌
碱性胆盐琼脂 250用于分离菌
胰膘肉汤基础 100用于肺炎链球菌、菌属细菌的培养
豆粉琼脂（血琼脂基础） 250用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂
细菌L型增菌液65用于L型细菌增菌培养
细菌L型分离琼脂110用于L型细菌分离培养
溶血琼脂基础250用于鼠疫杆菌培养
龙胆紫血液琼脂基础250用于鼠疫杆菌的选择性培养
改良罗氏培养基基础 250用于结核杆菌的培养、计数、保存、照光试验、药物敏感性测定及菌型鉴定等
酸性L-G培养基基础250适用于碱性物质处理的结核杆菌标本
碱性L-G培养基基础250适用于酸性物质处理的结核杆菌标本
PNB（对硝基苯甲酸）1加入改良罗氏培养基中制成PNB培养基，用于分枝杆菌菌型鉴定
TCH（噻吩-2-羧酸酰肼）0.1加入改良罗氏培养基中制成TCH培养基，用于分枝杆菌鉴定
戊烷脒多粘菌素B琼脂基础250用于杆菌的培养及初步鉴定
碳酸氢钠琼脂基础250用于杆菌的荚膜培养
指示选择性培养基基础250用于杆菌的分离鉴别
PLET 琼脂基础250用于杆菌的分离鉴别
戊烷脒50mg加入戊烷脒多粘菌素琼脂
杆菌疫苗50人份/5支杆菌检测用配套试剂
杆菌沉淀血清1ml杆菌检测用配套试剂
杆菌1ml杆菌检测用配套试剂
杆菌诊断抗原1ml杆菌检测用配套试剂
青霉素敏感纸片20片杆菌检测用配套试剂
印度墨汁50ml杆菌检测用配套试剂
碘伏（液体）500g杆菌检测用配套试剂
溶菌酶2000万单位/g杆菌检测用配套试剂
美蓝（亚甲基蓝）25g杆菌检测用配套试剂
水杨素1g进口分装，与HB116配套使用
MiddleBrook 7H10 琼脂250用于分枝杆菌的分离培养
MiddleBrook 7H11 琼脂250用于分枝杆菌的分离培养
气单胞菌鉴别琼脂 250用于分离培养和鉴别气单胞菌
精氨酸肉汤250用于游泳池中假单胞菌检测(Merck方法)
曲霉素琼脂基础(AFPA)250用于曲霉菌分离培养
假单胞分离琼脂250用于假单胞菌群的测定
假单胞分离肉汤250用于假单胞菌群增菌培养
肌醇测定培养基250用于婴幼儿配方食品和乳粉中肌醇测定
溴甲酚紫葡萄糖肉汤250用于低酸性罐头食品商业无菌检验（GB标准）
酸性肉汤250用于酸性缺罐头食品商业无菌检验（GB标准）
烟酸测定培养基250用于婴儿食品和乳粉中烟酸和烟酰胺测定
