1)
elisa试剂盒包被液(PH6.3的碳酸盐缓冲液)无水Na2CO3 0.1696g NaHCO3 0.2856g SW 100ml 彻底溶解至4℃,一星期内运用
2)PBST配方 NaCl 8.0g Na2HPO4.12H2O 2.9g KCl 0.2g KH2PO4 0.24g TW-20 0.5ml SW 1000ml
3)底物缓冲液 Na2HPO4 3.682g 柠檬酸 1.02g DW 200ml 不需灭菌,4℃保留
4)3% H2O2 30%H2O2 100ml SW 900ml
5)显色剂 底物缓冲剂 10ml 3%H2O2 150ul OPD 15mg 其间H2O2 最终加
6)停止液 浓硫酸:SW = 1:8 浓硫酸缓慢参加到SW 中,并拌和散热
1elisa试剂盒 包被:所谓37℃反响,通常取一个37℃的水浴锅,在水面放一较大泡沫板,将ELISA板臵于泡沫板上即可,其余过程的37℃反响操作同此; 全部ELISA进程中一切需求较长时刻等待的过程(包被、封闭、加一抗孵育、加二抗孵育)均需求将ELISA包起来再放入冰箱或水浴锅中,通常可直接用一次性EP手套套起来即可。
2 洗刷:最惯例的洗刷过程是洗刷3次,每次距离5min,详细试验可能会微调,洗刷次数可以3-6次不等,距离5-10min不等; 每次洗刷后要将ELISA板尽可能拍干后在进行下一步操作,尤其是每个洗刷过程的最终一次洗刷要尽可能拍干,拍干可在纱布、吸水纸上进行,也可以采购洗板机。
3 显色:制造显色液时3%过氧化氢一定要最终参加,参加混匀后立刻分装到ELISA板中,即在加过氧化氢前要彻底完结洗刷的操作; OPD通常在倒数第2次洗刷前参加,要留有约10min时刻以确保OPD彻底溶解。
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