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北京组织细胞基因组DNA提取试剂盒厂家
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价格:¥540
更新日期:2026/5/25 18:54:58
生 产 地:中国大陆
产品型号:ALH125
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详细内容
名称:北京组织细胞基因组DNA提取试剂盒厂家
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:50次|100次|200次
编号:ALH125
本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液,首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(200次):
RNase A(10mg/ml)——————400μl
细胞核裂解液————————120ml
蛋白沉淀液—————————40ml
DNA溶解液—————————30ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代'仿')等试剂。
2.快速,简捷,组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70%乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织)、0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:组织细胞基因组DNA提取试剂盒|组织DNA提取试剂盒|细胞DNA提取试剂盒.jpg)
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·耐热M-MuLV反转录酶
编号:ALH260
英文名称:Thermostable M-MuLV reverse transcriptase
规格:5000U|10000U
本品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。 同时经过多点突变,提高了反转录温度耐受性,可以在45-55℃进行反转录(更高温度反转时活性会部分减低)。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时更高的反转录温度大大的提高了GC含量高,二级结构丰富的RNA模板的反转录效率。本酶浓度为200 units/μl
试剂盒组分(5000U):
M-MuLV(RNase Hˉ)(200U/μl)-————5000U
5×RT Buffer————————————500μl
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
储存条件:-20℃。
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·热启动Taq PCR MasterMix
编号:ALH249
英文名称:2×HotStart Taq PCR MasterMix
规格:0.5ml|5ml
本产品包含HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新独特的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×HotMaster Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀。
产品组份:HotMaster Taq DNA Polymerase:0.05units/μl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM;稳定剂;增强剂。
储存条件:-20℃。
·大量组织细胞RNA提取试剂盒
编号:ALH021
英文名称:Massive Total RNA Extraction Kit From Cell & Tissue
规格:10次
本试剂盒在无苯酚、氯*(代'仿')RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。本大量RNA提取试剂盒的柱子样本处理量是普通提取的20倍,独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组分:
裂解液RLT Plus————>100ml
去蛋白液RW1——————>120ml
漂洗液RW———————>25ml×2
70%乙醇————————>15ml×2
RNase-free H2O—————>10ml
基因组DNA清除柱和收集管————>10套
RNase-free吸附柱和收集管————>10套
储存条件:室温,有效期6个月。
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代'仿')等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成,使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过100mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过6x107细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过6×107,组织不超过200mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
5. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA为rRNA,电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA条带。动物rRNA大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S和18S rRNA。动物RNA样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0倍,否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯。
浓度:取一定量的RNA,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA 浓度的计算 终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40.jpg)
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