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抗氧化剂Catechin hydrate(儿茶素水合物)库存
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价格:¥910
更新日期:2026/5/25 18:53:40
生 产 地:中国大陆
产品型号:YT302
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详细内容
名称:抗氧化剂Catechin hydrate(儿茶素水合物)库存
规格:0.5g
英文名:(+)-Catechin hydrate
产地:国产|进口
编号:YT302
品牌:百奥莱博
本品是一种植物来源的天然抗氧化剂。可以清除自由基,在许多不同的生物体系中可以防止自由基导致的损伤。例如可以抑制羟基自由基诱导的DNA断裂,抑制脂氧化,减缓内源脂溶性抗氧化剂的消耗等。溶解于乙醇,可以配制成50mg/ml的水溶液。
性状:浅灰黄色粉末
分子量:290.27
分子式:C15H14H6
纯度:>98%。
注意事项:如果配制成溶液,分装后-20℃保存,半年有效。
储存条件:4℃,有效期2年。.jpg)
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·T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
编号:YT513
英文名称:T4 Polynucleotide Kinase
规格:100U|500U
本酶是一种多聚核苷酸5'羟基激酶,可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应:5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。
上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下,T4 Polynucleotide Kinase可以显示出5'磷酸酯酶的活性,催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产生相同的反应:5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(最适pH为6.4左右)。
当ATP和ADP都适量存在时,T4 Polynucleotide Kinase可以催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'磷酸基团和ATP的γ位磷酸基团之间的交换反应。其他NTP也可产生相同的反应:5'-P + NTP + NDP→5'-P + NDP + NTP。T4 Polynucleotide Kinase同时具有3'磷酸酯酶活性,可催化3'磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化:3'-P → 3'-OH + Pi(最适pH为5.9左右)。T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近,而磷酸酯酶活性在N-末端附近。
产品组份:
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl) ——————100U
Reaction Buffer A(10X)————————————80μl
Reaction Buffer B(10X)————————————40μl
24% PEG Solution———————————————40μl
用途:寡核苷酸、DNA或RNA的5'末端标记,用作Southern、Northern、EMSA等的探针,凝胶电泳的marker,DNA测序引物,PCR引物等;使寡核苷酸、DNA或RNA的5'端磷酸化,确保后续连接反应顺利进行;催化3'磷酸化的单核苷酸的5'磷酸化,使该单核苷酸可以和DNA或RNA的3'末端连接;去除3'端磷酸基团。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟内,将转移ATP上1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5'-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件:100mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgCl2,5mM DTT,0.5mM 5'-OH DNA,0.05mM ATP,0.1MBq/ml [γ-33P]-ATP。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl(pH7.5),25mM KCl,0.1mM EDTA,2mM DTT,50% glycerol。
Reaction Buffer A(10X)(用于磷酸化反应):500mM Tris-HCl(pH7.6 at 25℃),100mM MgCl2,50mM DTT,1mM spermidine,1mM EDTA。
Reaction Buffer B(10X)(用于交换反应):500mM imidazole-HCl(pH6.4 at 25℃),0.18M MgCl2,50mM DTT,1mM spermidine,1mM EDTA,1mM ADP。
失活或抑制:75℃加热10分钟可使T4 Polynucleotide Kinase失活,加入EDTA也可使T4 Polynucleotide Kinase失活。金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性。
储存条件:-20℃。
注意事项:
1. 铵盐沉淀获得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。铵盐可强烈抑制T4 Polynucleotide Kinase的酶活性。
2. PEG可促进磷酸化反应速率和效率;交换反应体系应加入PEG。
使用说明:
1. DNA 5' 末端标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA—————————————————1~20pmol (5' 末端)
Reaction Buffer A (10X)———————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)————20pmol
补充无核酸酶的去离子水 ———————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)——————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代'仿')抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
2. DNA 5’ 末端磷酸化:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA————————————————1~20pmol (5' 末端)
Reaction Buffer A (10X)——————————2µl
0.1mM ATP—————————————————1µl
补充无核酸酶的去离子水 ——————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)—————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代'仿')抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
3. 通过交换反应(exchange reaction)进行DNA 5' 末端标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA——————————————————1~20pmol (5' 末端)
Reaction Buffer B (10X)————————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)—————40pmol
24% PEG Solution ———————————————4µl
补充无核酸酶的去离子水 ————————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)———————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代'仿')抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
4. 其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。.jpg)
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