I125同位素标记载体/蛋白类药物的动物模型药物代谢/药效研究实验外包服务

I125同位素标记载体/蛋白类药物的动物模型药物代谢/药效研究实验外包服务

西安齐岳生物科技有限公司可以提供同位素标记的蛋白类药物或者纳米载体或相关介质的动物的药代动力学实验外包服务，我们可以提供关于在体内的吸收、分布、代谢、排泄试验、药物代谢、药代动力学、药效研究等等数据。为您提供高质量的数据和快速的周转期以支持各项药物开发、临床前研究和临床研究。提供动物包括：小鼠，大鼠，豚鼠，兔，犬类，非灵长类，小型猪等。主要动物模型包括：肿瘤疾病模型、消化系统疾病动物模型、内分泌疾病动物模型、代谢疾病动物模型、炎症和免疫性疾病动物模型、神经系统疾病动物模型等。

肿瘤模型按照建立的方法及研究目的的不同可分为基因修饰小鼠肿瘤模型、自发和诱发小鼠肿瘤模型和移植小鼠肿瘤模型，本公司可以根据需求提供适于客户研究所必需的肿瘤模型。

1. ¹²⁵I 同位素标记技术

主要利用Iodogen 法或氯胺-T法将¹²⁵I 标记到目标蛋白药物上，标记过程严格按照所用的标记方法进行操作。纯度高于98%的蛋白类药物，且不含任何赋形剂或稳定剂，基本全部能够标记成功。

标记之后的标记物会利用放射性薄层扫描仪或放射性HPLC对标记物进行标记率的测定，然后利用分子筛凝胶色谱对标记物进行分离纯化，收集的分离液体分别进行放射性cpm计数和蛋白浓度的测定。最终收集放射性计数和蛋白浓度最高的分离液体，并利用放射性薄层扫描仪或放射性HPLC对其进行放化纯度鉴定，要求放化纯度高于96%方可进行后续药代特性的研究。

2. （TCA）沉淀法测定¹²⁵I-受试药物含量的方法学确证

    取正常SD大鼠血清、心、肝、脾、肺、肾、胸腺、脂肪、肌肉、肠内容物和尿等12种器官/组织或体液及缓冲液。制成匀浆，加入3-5个不同蛋白含量的放射性¹²⁵I-受试药物，样本混匀后，加入等量20 %TCA沉淀蛋白，测定组织总放射性；离心后吸出上清，g计数仪测定上清中g放射性。利用所获得的数据建立不同组织的蛋白浓度-放射性计数的标准曲线，并进行其方法学验证（主要包括方法的特异性、灵敏度、线性和精密度、回收率等）。

3. 药物浓度-时间曲线

实验所需的SD 大鼠、Balb/c 小鼠，能够提供实验动物的合格证。核医学应用研究室具有专一的动物饲养室，饲养环境为IVC独立送风系统，小鼠饲养区有56笼，大鼠饲养区25笼，饲养环境和空间能够满足至少2个药代项目同时进行且互不干扰。

 

药物非临床药代动力学研究技术指导原则（第二稿）中指出，以血药浓度-时间曲线的每个采样点一般不少于6个数据为限计算所需动物数。建议受试动物采用雌雄各半。我们会根据指导原则中的要求进行采样时间的设定，为保证最佳采样点，我们会在正式试验前进行预试验，然后根据预试验的结果，审核并修正原设计的采样点。精准的药物注射和熟练的采血技术能够满足此项实验顺利进行。取血后离心取血清，血清加入等量20 %TCA沉淀蛋白，测定总γ放射性；离心后分别测定沉淀部分和上清部分的γ放射性。药物浓度以当量浓度（ng Equ·mL^-1）表示。根据试验中测得的各受试动物的血药浓度-时间数据，求得主要药代动力学参数。静脉注射给药，应提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表观分布容积）、AUC（血药浓度-时间曲线下面积）、CL（清除率）等参数值；血管外给药，应提供Cmax和Tmax（达峰时间）、 t1/2（消除半衰期）等参数。

4. 组织分布

我们会根据药物非临床药代动力学研究技术指导原则（第二稿）和所获得的血药浓度-时间曲线数据选取3-4个时间点分别代表吸收相、平衡相和消除相的药物分布。每个时间点6只实验动物，雌性各半，在尽可能的将体内血液全部放出后，分别取出取胸腺、心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾上腺、肾脏、肠淋巴结、肠内容物、空肠、脂肪、肌肉、骨髓、脑、血清和尿液等组织，称重后将组织匀浆、TCA沉淀、离心后分别测定上清和沉淀内放射性计数。以ng Equ·g^-1新鲜湿重或ng Equ·mL^-1体积表示放射性浓度。

5. 粪尿排泄试验

将动物放入代谢笼内，选定一个有效剂量给药后，按一定的时间间隔分段收集尿或粪的全部样品，测定药物浓度。粪样品收集后按一定比例制成匀浆，记录总体积，取部分样品进行药物含量测定。计算药物经此途径排泄的速率及排泄量，直至收集到的样品测定不到药物为止。每个时间点至少有5只动物的试验数据。

6. 胆汁排泄试验

 6只SD大鼠 (雄3只，雌3只，体重200 ± 20g) ，切开腹腔，分离胆总管，远端结扎，近端插入引流管引流胆汁，注射药物后收集胆汁，测定γ放射性，计算排出放射性占注入放射性量的百分数。

  拟开展大鼠在胆汁插管后，清醒状态下收集胆汁，目前正在联系相关动物实验技术人员。

7. 血浆蛋白结合试验

取正常大鼠血浆，每管200 mL，分别加入不同浓度的¹²⁵I-受试药物。4°C 过夜或37°C水浴5 min后，取血浆直接放射性薄层层析或于放射性HPLC进样。利用放射性薄层扫描或者连接有放射性检测器的HPLC 直接检测，并利用仪器所带有的软件处理放射性色谱图。

基于原有的U-3000 HPLC和连接的放射性检测器，目前正在购买TSK-3000 蛋白柱并进行试验，如果能够试验成功，血浆蛋白结合试验、生物样品中（血液、胆汁、尿液）中的药物原形检测均能够成功检测。

8. 试验中所需仪器

9实验室相关仪器一览
 

可以根据文献制备特殊定制类产品。（zhn2019.04.15）

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