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ELISA不同检测方法的具体步骤
点击次数：280 发布时间：2017/8/22 11:00:22
ELISA不同检测方法的具体步骤,对于elisa是用于测定抗原也可以测定抗体，而且根据实际的来源和标本的性状以及检测具备的条件，可以设计出很多中检测方法，下面我们金益柏的操作人员就带您一起领略下不同elisa实验方法的具体操作步骤。
针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
首先将特异性抗体包被于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，另一组只加酶标记抗原，经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。此方法测定的抗原只要有一个结合部位即可，对小分子抗原如激素和药物类的测定常用此法。优点是快，缺点是需要较多量的酶标记抗原。
被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成正比，二者之差即为预测抗原的量。
4. 间接法测抗体
是检测抗体最常用的方法，原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。
本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体。主要用于对病原体的检测而进行传染病的诊断。
1. 双抗体夹心法测抗原
针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
2. 竞争法测抗原
首先将特异性抗体包被于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，另一组只加酶标记抗原，经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。此方法测定的抗原只要有一个结合部位即可，对小分子抗原如激素和药物类的测定常用此法。优点是快，缺点是需要较多量的酶标记抗原。
3. 免疫抑制法测抗原
被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成正比，二者之差即为预测抗原的量。
4. 间接法测抗体
本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体。主要用于对病原体的检测而进行传染病的诊断。
