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circRNA荧光定量PCR技术
点击次数：779 发布时间：2016/9/5 11:05:08
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陈**
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circRNA荧光定量PCR实验
circRNA是通过特殊的选择性剪切产生封闭环状结构的非编码RNA。circRNA不受RNA外切酶的影响，比线性RNA表达更稳定。研究表明，某些特殊的circRNA分子富含 miRNA结合位点，在细胞中起到miRNA sponges的作用，进而解除 miRNA 对其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含 63 个保守的 miR-7结合位点，该circRNA在细胞中能够有效吸附miR-7。而miR-7 作为关键调节因子广泛参与癌症途径，如抑制在乳腺癌、胶质瘤等癌症中表达显著上调的Pak1的表达；miR-7 也能通过结合α-synuclein抑制其表达。这些研究暗示ciRS-7通过ceRNA机制调节miR-7的功能，是神经系统疾病和癌症治疗的潜在靶点。
CirRNA定量PCR实验流程如下：
1、样品RNA抽提
2、RNA质检
3、RNA逆转录cDNA
4、cirRNA特殊引物设计及其调试
5、cirRNAPCR扩增
6、PCR数据统计
circRNA是通过特殊的选择性剪切产生封闭环状结构的非编码RNA。circRNA不受RNA外切酶的影响，比线性RNA表达更稳定。研究表明，某些特殊的circRNA分子富含 miRNA结合位点，在细胞中起到miRNA sponges的作用，进而解除 miRNA 对其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含 63 个保守的 miR-7结合位点，该circRNA在细胞中能够有效吸附miR-7。而miR-7 作为关键调节因子广泛参与癌症途径，如抑制在乳腺癌、胶质瘤等癌症中表达显著上调的Pak1的表达；miR-7 也能通过结合α-synuclein抑制其表达。这些研究暗示ciRS-7通过ceRNA机制调节miR-7的功能，是神经系统疾病和癌症治疗的潜在靶点。
CirRNA定量PCR实验流程如下：
1、样品RNA抽提
2、RNA质检
3、RNA逆转录cDNA
4、cirRNA特殊引物设计及其调试
5、cirRNAPCR扩增
6、PCR数据统计
原创作者：南京金益柏生物科技有限公司
