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单细胞培养

点击次数:300 发布时间:2016/6/27 16:13:19
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单细胞培养(single cell culture)亦称游离细胞培养(free cell culfure)。是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养。从多细胞生物中得到单细胞的办法是,开始对切离的组织的初始培养物(Primary culture)进行振荡培养,然后在连续培养中用适当的筛孔将游离的细胞分筛出来,再将收集起来的游离的单细胞悬浮在液体培养基中,最后用微量吸管吸取一个细胞。动物细胞的单细胞培养时,要适当稀释接种,为使得到的单细胞进行增殖,可以采用微量培养法和保护培养法,对浮游的单细胞群进行平面培养。单细胞培养物的目的,在于可以得到来自单个细胞的细胞群的无性繁殖系(clone)(无性繁殖系化)。[1]
性质编辑
单细胞培养常见模型:
①在培养碟中原位单细胞微吸吮捕获、沉积分选培养模型
传统的荧光活化细胞分选方法(FACS)采用流式细胞术用来分选细胞,是分子基础分选中普遍使用的方法。这种方法只能检测具有荧光活性的细胞,不但细胞存活率低、纯度低,而且极易破坏细胞组织。
微吸吮单细胞分选培养模型是与倒置显微镜配合使用的,用于细胞筛选、提取、沉积的。
◇ 可直接从培养皿中进行细胞分选
◇ 分离粘结活细胞的细胞亚群,分离荧光或者冷光标记
◇ 无标记的和荧光的细胞都可通过软件进行自动识别
◇ 可确保细胞分离后活力,并且可培养
◇ 分选荧光分子探针标记的特定细胞
◇ 单细胞收集进行进一步培养、克隆,RNA 或者蛋白质制备
◇ 免疫制备,进行目标细胞分类
◇ 可对各种粘结细胞进行分类
◇ 细胞筛选前的细胞培养
◇ 一般的分选过程只需几分钟就可完成
◇ 使用安装在显微镜上的荧光滤片可实现多通道监测
◇ 分选速度为1Cell/秒每一个循环可筛选1~1000个细胞
②单细胞培养分析跟踪板模型
③使用把显微镜升级改造为纳米激光镊捕获操纵单细胞模型
这种模型很简单,在已有显微镜上加上纳米激光器或芯片就可以了
④使用活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模型
活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模式可在无任何标记情况下对活细胞进行三维扫描测定
其分子分布,更具优越性。活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模式为医师,药师和生物学家
提供了利用拉曼光谱的便利的方式,不仅可以识别各种基团,还可以对化合物进行高精确度分析,
且对活细胞不需要使用生化标记物,荧光标记物或者抗体,对活细胞绝对安全。

原创作者:上海一研生物科技有限公司

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