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艰难梭菌产生多种毒素
点击次数：274 发布时间：2016/12/12 12:04:34
艰难梭菌产生多种毒素，最为人所知的是毒素A和毒素B。Dong着重关注毒素B，其中毒素B已被证实即便在毒素A不存在时也能够独自导致疾病。
Dong说，“我们已知道这些毒素靶向和破坏结肠上皮细胞，而且它们可能劫持一种细胞表面蛋白作为它的受体。然而，毒素B的特异性受体一直是个谜。”
Frizzled受体是通过一种新的方法而被鉴定出的。作为Dong实验室的一名博士后研究员，Tao与来自马萨诸塞大学医学院Abraham Brass博士实验室的研究员Paul Meraner博士合作开展研究。他们首先利用新开发的CRISPR/Cas9基因编辑技术开展全基因组筛选，让体外培养的人细胞中的基因发生突变。
Brass说，“Cas9技术起源自细菌，因此利用Cas9了解医院中最坏细菌之一是令人欣慰的。作为胃肠科医生，我已观察到太多的由艰难梭菌导致的困难，因而期待我们战胜它的那一天。”
如今，Tao和Meraner拥有细胞培养板，每个细胞携带一种让一个不同的基因失去功能的突变。Tao说，“我们然后将毒素B加入到这些培养板中，寻找具有抵抗性的细胞。
大多数细胞都被这种毒素杀死，不过并不是所有的细胞都被杀死。在四轮筛选后，研究人员获得未受到损伤的细胞群体。他们推论这些细胞携带保护它们免受这种毒素伤害的突变。但是突变发生在哪个基因上呢？
Tao说，研究人员利用下一代测序技术揭示出这些存活下来的细胞发生多种突变，“有一种突变就发生在一种被称作Frizzled的受体上”。
在此之后，Tao首先证实毒素B利用Frizzled作为它的受体入侵体外培养的人细胞。接下来，通过与来自波士顿儿童医院内分泌学系的Ji Miao博士和David Breault博士合作，Tao利用结肠干细胞构建“类器官（organoid）”－－-微型的三维肠道组织培养物。当编码Frizzled受体的基因被剔除时，这种类器官就对这种毒素产生抵抗性；那些保留Frizzled基因的类器官遭受到明显的损伤。
最后，Tao与Dong实验室高级研究员Jie Zhang博士合作在小鼠体内开展研究，也取得类似的结果。
Dong说，“我们已知道这些毒素靶向和破坏结肠上皮细胞，而且它们可能劫持一种细胞表面蛋白作为它的受体。然而，毒素B的特异性受体一直是个谜。”
Frizzled受体是通过一种新的方法而被鉴定出的。作为Dong实验室的一名博士后研究员，Tao与来自马萨诸塞大学医学院Abraham Brass博士实验室的研究员Paul Meraner博士合作开展研究。他们首先利用新开发的CRISPR/Cas9基因编辑技术开展全基因组筛选，让体外培养的人细胞中的基因发生突变。
Brass说，“Cas9技术起源自细菌，因此利用Cas9了解医院中最坏细菌之一是令人欣慰的。作为胃肠科医生，我已观察到太多的由艰难梭菌导致的困难，因而期待我们战胜它的那一天。”
如今，Tao和Meraner拥有细胞培养板，每个细胞携带一种让一个不同的基因失去功能的突变。Tao说，“我们然后将毒素B加入到这些培养板中，寻找具有抵抗性的细胞。
大多数细胞都被这种毒素杀死，不过并不是所有的细胞都被杀死。在四轮筛选后，研究人员获得未受到损伤的细胞群体。他们推论这些细胞携带保护它们免受这种毒素伤害的突变。但是突变发生在哪个基因上呢？
Tao说，研究人员利用下一代测序技术揭示出这些存活下来的细胞发生多种突变，“有一种突变就发生在一种被称作Frizzled的受体上”。
在此之后，Tao首先证实毒素B利用Frizzled作为它的受体入侵体外培养的人细胞。接下来，通过与来自波士顿儿童医院内分泌学系的Ji Miao博士和David Breault博士合作，Tao利用结肠干细胞构建“类器官（organoid）”－－-微型的三维肠道组织培养物。当编码Frizzled受体的基因被剔除时，这种类器官就对这种毒素产生抵抗性；那些保留Frizzled基因的类器官遭受到明显的损伤。
最后，Tao与Dong实验室高级研究员Jie Zhang博士合作在小鼠体内开展研究，也取得类似的结果。
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