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3MM滤纸在RNA印迹中的使用

点击次数：237 发布时间：2016/8/12 13:31:55

商家名片

黄*

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3MM滤纸在RNA印迹中的使用

【实验目的】

掌握RNA印迹技术的基本原理，学习RNA印迹技术的操作方法，了解RNA印迹技术的意义与应用。

【实验原理】

将RNA变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同，但RNA变性方法与DNA不同，不能用碱变性，因为碱会导致RNA的水解。

Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水平的研究以及对同一组织细胞的不同基因间的表达水平进行比较，或者对不同组织细胞间相同基因的表达水平进行比较。

【实验对象】

待测RNA样品。

【试剂与器材】

1．焦碳酸二乙酯（DEPC）。

2．甲醛变性琼脂糖凝胶电泳所需试剂。

3． 0.5 mol ／ L乙酸铵（NH4Ac）。

4．溴化乙啶（EB）：0.5μg／ml，溶于0.5mol／L乙酸铵中。

5． 0.05mol ／ L NaOH／1.5mol／L NaCI（选用）。

6． 0.5mol ／ L Tris·CI （pH 7.4）／1.5mol／L NaCl（选用）。

7． 20×SSC、6×SSC和2×SSC。

8．亚甲蓝（终浓度为0.03％），溶于0.3mol ／ L （pH 5.2）的乙酸钠缓冲液中（选用）。

9． *纤维素（NC）膜或尼龙膜。

原创作者：上海一研生物科技有限公司