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细胞凋亡检测方法
点击次数：208 发布时间：2016/7/29 13:19:26
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黄*
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（一）药物对肿瘤细胞的抑制效应的MTT法:
用将肿瘤细胞调整至2 X108个/L,在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜.
次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组,设加完全培养基不加药物的阴性对照,并用功能明确的药物为阳性对照和0.5%的乙醇溶剂对照,每组均设4-6个复孔（平行孔）、37℃、5% CO2继续培养.
培养至12h、24h、48h、实验终止前4-6h加入10ulMTT（5g/L）,培养4-6h后,阴性对照孔中已形成明显的蓝紫色颗粒结晶时加100ul/孔SDS-HCl终止反应,于37℃存放过夜.
用在A570波长下测吸光度值,按下式计算抑制率
抑制率（%）=（1-试验组平均吸光度值/阴性对照组平均吸光度值） x 100%.
（二）荧光法:
选用上述最佳浓度作用于肿瘤细胞,培养细胞48h后,收货细胞用PBS洗2-3次后用0.4%多聚甲醛室温下固定30min.
用将肿瘤细胞调整至2 X108个/L,在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜.
次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组,设加完全培养基不加药物的阴性对照,并用功能明确的药物为阳性对照和0.5%的乙醇溶剂对照,每组均设4-6个复孔（平行孔）、37℃、5% CO2继续培养.
培养至12h、24h、48h、实验终止前4-6h加入10ulMTT（5g/L）,培养4-6h后,阴性对照孔中已形成明显的蓝紫色颗粒结晶时加100ul/孔SDS-HCl终止反应,于37℃存放过夜.
用在A570波长下测吸光度值,按下式计算抑制率
抑制率（%）=（1-试验组平均吸光度值/阴性对照组平均吸光度值） x 100%.
（二）荧光法:
选用上述最佳浓度作用于肿瘤细胞,培养细胞48h后,收货细胞用PBS洗2-3次后用0.4%多聚甲醛室温下固定30min.
弃去固定液,并用PBS洗2次后,用1%Triton X-100作用4min加入适量的0.5mg/L DAPI荧光染色60min,用PBS冲洗3次,取10ul滴片,干燥后于荧光显微镜下检测断裂的颗粒和片状荧光.
大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)elisa试剂盒进口分装，英文名：ATP6AP2 ELISA Kit
大鼠轻肽铁蛋白(FTL)ELISA试剂盒进口分装，英文名：FTL ELISA Kit
大鼠亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒进口分装，英文名：CYPB ELISA Kit
大鼠亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒进口分装，英文名：CYPA ELISA Kit
大鼠鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶2(SGPP2)ELISA试剂盒进口分装，英文名：SGPP2 ELISA Kit
大鼠鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(SGPP1)ELISA试剂盒进口分装，英文名：SGPP1 ELISA Kit
大鼠羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ)ELISA试剂盒进口分装，英文名：HADHβ ELISA Kit
大鼠前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA试剂盒进口分装，英文名：ACP3 ELISA Kit
大鼠前列腺素F受体(FP)ELISA试剂盒进口分装，英文名：FP ELISA Kit
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大鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA试剂盒进口分装，英文名：PTGES2 ELISA Kit
大鼠前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒进口分装，英文名：PKR1 ELISA Kit
原创作者：上海一研生物科技有限公司
