猪Ⅲ型前胶原肽（PⅢNP）elisa试剂盒使用说明书

猪Ⅲ型前胶原肽（PⅢNP）ELISA试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；

（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；

（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。

1. 酶联板：一块（96孔）。

2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,600 pg/ml，将其稀释为400 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别稀释成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3. 样品稀释液：1×20ml。

4.检测稀释液A：1×10ml。

5. 检测稀释液B：1×10ml。

6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

11.覆膜：5张。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜,37℃反应60分钟。

3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000xg离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

以标准物的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curveexpert1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

公司专业从事科研试剂和诊断试剂研究的生物技术企业，也是集科技研究、产品生产、市场营销和技术服务于一体的高新技术企业。公司拥有完善的ELISA服务平台，成熟的抗原、抗体服务系统，专业酶联研发团队及先进的实验设施，此外，公司与各大高校院所合作，聘请资深研究人员作为项目技术顾问，有任何试剂盒方面的问题都能帮您解决,免除您的后顾之忧。欢迎广大新老客户来电咨询！

人抗钙蛋白酶抑素抗体（ACAST-DⅣ）ELISA试剂盒使用

人磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）ELISA检测试剂盒

马胰腺甘油三酯脂酶（PNLIP）ELISA试剂盒使用

人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B（S100A9）ELISA检测试剂盒

昆虫环磷酸鸟苷（cGMP）ELISA测定试剂盒,96T/48T

大鼠胰岛素（INS）ELISA试剂盒,96T/48T,KB10692

人丙酮酸激酶R型同工酶（RPK）ELISA试剂盒,96T/48T,KB14520

人胱天蛋白酶1（Casp1）ELISA酶免试剂盒

人水蛭素（Hirudin）ELISA酶免试剂盒,People hirudin （Hirudin） ELISA kit

人羰基还原酶[NADPH]1（CBR1/CBR/CRN）ELISA酶免试剂盒

人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶（STK）ELISA试剂盒

猪金属硫蛋白（MT）ELISA试剂盒,96T/48T,KB17821

大鼠Ⅳ型胶原α1（COL4α1）ELISA酶免试剂盒

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（sTRAIL）ELISA酶免试剂盒,Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand （sTRAIL） ELISA kit

豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物（PAP）ELISA测定试剂盒,96T/48T

犬白介素1α（IL1α）ELISA试剂盒,96T/48T,KB16905

牛奶三聚氰胺ELISA试剂盒

牛B淋巴细胞活化抗原B72（LAB72）ELISA检测试剂盒

大鼠高迁移率族蛋白1（HMG-1）ELISA试剂盒,96T/48T,KB12707

人B细胞活化因子（BAFF/CD257/TNFSF13B）ELISA测定试剂盒,96T/48T

人对氧磷酶3（PON3）ELISA检测试剂盒

兔肾上腺素（EPI）ELISA酶免试剂盒,Rabbit epinephrine （EPI） ELISA Kit

小鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）ELISA试剂盒

大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）ELISA检测试剂盒

人脂氧合酶同工酶1（LOX1）ELISA试剂盒使用

小鼠胶原酶I（CollagenaseI）ELISA试剂盒,96T/48T,KB10944

小鼠溶菌酶（LZM）ELISA试剂盒

人β2微球蛋白（MGβ2）ELISA试剂盒

大鼠Smad同源物3（Smad3）ELISA试剂盒

鱼维生素A（VA）ELISA试剂盒

人磷酸化cAMP反应元件结合蛋白1（pCREB1）ELISA测定试剂盒,96T/48T

犬正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）ELISA酶免试剂盒

人胎盘蛋白13（PP13）ELISA试剂盒使用

人抵抗素样分子β（RELMβ）ELISA酶免试剂盒,Human resistin-like molecule β （RELMβ） ELISA kit

鱼维生素D（VD）ELISA试剂盒

猪一氧化氮（NO）ELISA试剂盒,96T/48T,KB17732

昆虫羧酸酯酶（CES）ELISA试剂盒使用

人血小板衍化生长因子（PDGF）ELISA酶免试剂盒,Human platelet-derived growth factor （PDGF） ELISA kit

牛胱天蛋白酶8（Casp8）ELISA酶免试剂盒

人抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素（ADH/VP/AVP）ELISA酶免试剂盒

大鼠黄体生成素（LH）ELISA测定试剂盒

人二十二碳六烯酸（DHA）ELISA酶免试剂盒

山羊生长激素释放多肽（GHRP）ELISA试剂盒,96T/48T,KB12734

木聚糖酶（Xylanase）活性ELISA试剂盒使用

牛铜蓝蛋白（CP）ELISA试剂盒使用

鸡CD8分子（CD8）ELISA试剂盒

小鼠三碘甲状腺原氨酸（T3）ELISA检测试剂盒

兔白介素2（IL2）ELISA试剂盒,96T/48T,KB17193

大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2（Tie2）ELISA酶免试剂盒,Rat immunoglobulin-containing ring-like ａnd epidermal growth factor-like domain tyrosine kinase 2 （Tie2） ELISA kit

人维生素C（VC）ELISA试剂盒

人瘦素受体（Leptinreceptor）ELISA试剂盒

猪脂蛋白磷脂酶A2（LpPLA2）ELISA检测试剂盒

小鼠α1微球蛋白（α1-MG）ELISA酶免试剂盒

小鼠基质金属蛋白酶5（MMP-5）ELISA测定试剂盒,96T/48T

豚鼠白介素15（IL15）ELISA试剂盒,96T/48T,KB17220

人β肌动蛋白（βactin）ELISA酶免试剂盒

鱼葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）ELISA检测试剂盒

小鼠骨形成蛋白6（BMP-6）ELISA检测试剂盒

鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3（TRAILR3）ELISA检测试剂盒

昆虫半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）ELISA酶免试剂盒,Insect cysteine proteinase -3 （Caspase-3） ELISA Kit

人白细胞抗原G（HLA-G）ELISA测定试剂盒,96T/48T

大鼠凋亡相关因子（FAS/CD95）ELISA试剂盒使用

人骨成型蛋白4（BMP-4）ELISA酶免试剂盒

人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PCK）ELISA酶免试剂盒,People phosphoenolpyruvate carboxylase kinase （PCK） ELISA kit

大鼠碱性成纤维细胞生长因子6（bFGF-6）ELISA试剂盒,96T/48T,KB12522

人αL岩藻糖苷酶（AFU）ELISA酶免试剂盒,People αL fucosidase （AFU） ELISA kit

人转铁蛋白受体（TFR/CD71）ELISA酶免试剂盒

猪干扰素γ（IFNγ）ELISA检测试剂盒

人B细胞受体相关蛋白31（BCAP31）ELISA酶免试剂盒,Human B cell receptor-associated protein 31 （BCAP31） ELISA kit

小鼠转化生长因子（TGFβ2）ELISA检测试剂盒

小鼠αL艾杜糖苷酸酶（IDUA）ELISA试剂盒

人15脂加氧酶（15-LO/LOX）ELISA试剂盒使用

人神经细胞粘着分子（NRCAM）ELISA试剂盒

人吡啶酚（PYD）ELISA酶免试剂盒