牛凝血酶提高PCR的效率和特异性

PCR是许多领域的核心技术之一，比如疾病诊断和法医鉴定。尽管这种技术被广泛使用，但有时还是困难重重，特别是在扩增低拷贝、富含GC或复杂的样品时。随着新技术的发展，PCR也面临新的问题。例如，在适体（aptamer）的选择过程中观察到PCR偏向，而纳米材料的使用虽然能大幅提高PCR的特异性或灵敏度，但也可能抑制PCR。
 

为了解决这些问题，人们开始采用各种PCR添加剂和增强剂来提高PCR的产量、特异性和一致性。凝血酶是一种众所周知的丝氨酸蛋白酶，可将可溶性纤维蛋白原转化为不可溶的纤维蛋白，并催化其他许多与凝血相关的反应。在这项研究中，研究人员发现牛凝血酶作为一种通用的PCR增强剂相当有效。
 

研究人员通过多个种类的样品来证明牛凝血酶的PCR增强效果，包括低拷贝的合成单链DNA（ssDNA）、合成的ssDNA库、人类基因组DNA和乙型肝炎病毒基因组DNA。他们发现，在牛凝血酶存在时，引物二聚体条带全部消失，而PCR产物的产量明显增加。同时，牛凝血酶也能提高复杂样品的PCR效率，比如存在高浓度的无关DNA分子时。