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用什么方程拟合ELISA试剂盒曲线较合适?

点击次数:251 发布时间:2016/8/15 9:24:08
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用于免疫检测的所谓“标准曲线”其实称为拟合曲线比较合适。免疫检测时标准点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度如果和相应的吸光度(OD)值如果能够呈现直线关系当然是最理想的了,这时可以通过EXELL等方便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情况,标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。
关于标准曲线的拟合方式,直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA及其它生物学反应中的曲线拟合,但都只适用于曲线的一部分,有的适用于前半段,有的适用于后半段,有的适用于中间一段,而Logistic曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。当然,如果用于定量,还是在中间一段较好。这些方法虽然没有一种方法可以通用,但也都可以用。关键在于你的标准曲线做到了S形的哪一部分,你想检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓度部分可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部分可以用直线方程,中间部分可用对数方程,而中后段可用四参数。
目前国际上最流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合”,用这种拟合方式往往能够比较精确的反映浓度和吸光度的曲线关系,从而进一步比较正确的获得样品中待测物质的浓度值。
其实,在一个长的区间内,Logistic应该都能拟合得较为理想。但并不是说它就是万能的。事实上不仅是ELISA,其它很多生物学反应都是S形曲线,也都可以用Logistic曲线拟合。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。如果用来定量,S形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两端的平坦部分计算误差会大,有时甚至会很大。
phospho-NRP1(Thr916)磷酸化神经纤毛蛋白1抗体
NF11型神经纤维瘤抗体
phospho-NF1(Ser2515)磷酸化1型神经纤维瘤抗体
NUDEL中心粒蛋白Nudel抗体
phospho-NDEL1(Ser231)磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体
NSDHL类固醇脱氢酶样蛋白NSDHL抗体
Phospho-NFKB1(Ser373)磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
phospho-NF1(Ser2817)磷酸化1型神经纤维瘤抗体
Phospho-NMDAR2B (Tyr1474)磷酸化谷氨酸受体2B抗体
Phospho-NFKB1 (Thr931)磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-NFKB1 (Ser907)磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-NFKB1 (Ser337)磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-NFKB1 (Ser893)磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-NFKBIA (Tyr42) 磷酸化IKB α抗体

原创作者:上海邦景实业有限公司

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