过氧化物酶其测试原理及应用

过氧化物酶催化过氧化氢氧化酚类的反响，产品为醌类化合物，此化合物进一步缩合或与别的分子缩合，发生颜色较深的化合物。本试验以邻甲氧基苯酚（即愈创木酚）为过氧化物酶的底物，在此酶存鄙人，H2O2可将邻甲氧基苯酚氧化成红棕色的4-邻甲氧基苯酚红棕色的物质可用分光光度计在470nm处测定其消光值，即可求出该酶的活性。

过氧化物酶应用：
如过氧化氢酶便是过氧化物酶的一种。过氧化氢酶可与葡萄糖氧化酶配合使用，脱除蛋清中的葡萄糖，代替了传统的自然发酵的方法，从而提高产品质量，缩短生产周期。在医学上，也可作为工具酶，用于检验尿糖和血糖。现代医学上认为机体衰老与氧化有关，例如染色体、酶等的氧化。所以，一些有还原性功能的物质可以在某种程度上抗衰老，如过氧化物酶体，维生素C、E也有抗衰老作用。
过氧化物酶试验准备：

仪器：分光光度计、离心机、秒表、天平、研钵、磁力搅拌器

试剂：愈创木酚、30%H2O2、0.2mol/L磷酸缓冲液（7.8）、0.1mol/L磷酸缓冲溶液（PH6.0，见附录）

反应混合液[100mmol/L磷酸缓冲溶液（PH6.0）50ml，参加愈创木酚28μl，于磁力搅拌器上加热搅

拌，直至愈创木酚溶解、待溶液冷却后，参加（待溶液冷却后再参加，不然导致分解）30%H2O2

19μl，混合均匀，保留于冰箱中。

过氧化物酶实践的构成和装备：

试剂一：液体60ml×4瓶，4℃保留6个月

试剂二：粉剂×3瓶，4℃保留6个月

试剂二使用液的装备：临用每瓶粉剂参加10ml的双蒸水溶解，4℃避光保留

试剂三：液体5ml1瓶，4℃保留6个月

试剂三使用液的制造：临用前用双蒸水15倍稀释，使得1cm光径，双蒸水调零时A240保持在0.4摆布，现用现配。若A值太高，则加双蒸水稀释，若A值太低，则参加适量试剂三。（通常在25倍摆布稀释）

试剂四：液体50ml×2瓶，4℃保留6个月。