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REPLI-g Single Cell Kit (24)现货供应
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价格:¥1
更新日期:2026/8/7 19:27:25
生 产 地:中国大陆
产品型号:150343
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王**
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详细内容
REPLI-g Single Cell Kit (24)现货供应
操作流程
简单的单管式操作流程 – 一天内完成NGS前文库构建
REPLI-g Single Cell DNA Library Kit可为Illumina NGS平台在5-5.5小时内提供一种简单而快速制备DNA文库的方法,起始样本只需单个细胞或低至pg级的DNA。该试剂盒可提供完整的全基因组范围内高度均一化扩增流程,保证几乎没有序列偏倚产生,下游紧接的是快速的、单管式文库构建步骤。专门设计的缓冲液和试剂可保证从单细胞、少量样本或纯化的DNA中获得高产量的扩增后DNA,并确保序列的完全再现及扩增的无偏倚。
WGA首先进行的细胞样本裂解及DNA的变性,在加入中和缓冲液中止变性后,一种含有缓冲液和DNA聚合酶的预混液将会被加入到反应体系中,并可利用热循环仪设置30°C恒温扩增3小时。REPLI-g SC扩增后的DNA可在–20°C长期稳定保存,或直接用于后续文库的构建。在文库构建的过程中,有较长DNA段组成的样本将首先被打断成随机的文库片段。片段长度的中间值一般由下游应用及测序读长而确定,随后进行末端修复、加A尾等过程,并且平台特异性接头将会被连接到DNA文库的双端,使得文库适用于后续的测序过程。WGA过程一般可产生较高产量的DNA,因此将会有较多量的起始DNA可用于文库构建的过程而后续基于PCR的文库富集步骤可以被省略。然而,如果仍需文库富集步骤,也可选择一种经优化的高保真性扩增步骤用于提供低错误率及最小偏倚的高准确度文库DNA。
REPLI-g Single Cell Kit (24)现货供应
REPLI-g Single Cell Kit (24)现货供应
应用
REPLI-g Single Cell DNA Library K性能
覆盖基因组所有位点,十分适用于二代测序和其他下游应用
REPLI-g Single Cell Kit扩增的DNA平均长度大于10 kb,并且覆盖所有基因组位点。该产品已经过验证,适用于二代测序、基于芯片技术的比较基因组杂交(aCGH)和real-time PCR应用等多种下游分析。使用该产品无需单独进行PCR扩增,减少了手动操作,获得的产物长度PCR方法更长(参见Next-generation sequencing using REPLI-g amplified DNA requires less hands-on time and generates more sequence information than PCR-based methods)。用扩增产物进行二代测序,获得高品质结果。这表明该试剂盒的位点覆盖率大,错配率低,其扩增的DNA(甚至从单一细菌细胞中扩增的DNA)能够与纯化获得的基因组DNA相媲美(参见Comparable NGS results)。另有研究对人类常染色体和X染色体上的多个标记物进行了分析,三个独立的实验均显示:基因组的所有位点被成功扩增,没有遗漏任何一个位点(参见Complete genome coverage)。
表1. 样本类型和研究领域
样本类型(细胞/DNA)研究领域
人类/动物生物标记物研究(SNP、突变、CNV)
干细胞研究
循环胚胎细胞分析
嵌合体研究
遗传易感性研究
转基因动物基因分型
癌症体细胞遗传变异分析
肿瘤恶化
肿瘤干细胞/进化
循环肿瘤细胞分析
细菌宏观基因组学研究
病原体分析
微生物基因分型
Plants*植物气孔研究
花粉分析
* 没有细胞壁的细胞或纯化的基因组DNA。it可提供一种用于单细胞样本的高效、无需PCR的文库构建方法,特别适合于发育生物学研究、微生物研究、肿瘤细胞异质性分析以及循环肿瘤细胞的基因组多样性研究。
无需PCR的无偏倚单细胞文库构建
从单细胞开始的完整而准确的转录组测序覆盖度保证
标准化操作步骤确保快速的结果获取
对于低丰度转录本实现最小的扩增偏倚及灵敏检测
高质量的文库可即用于任何Illumina NGS平台
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