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关于试剂盒实验技术性问题的解答 关于在试验中科研者提出的有关试剂的一些问题,我司技术人员作出了专业性的解答:  问题:背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2) =

点击次数:178 发布时间:2017/3/20 18:46:51
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关于试剂盒实验技术性问题的解答

关于在试验中科研者提出的有关试剂的一些问题,我司技术人员作出了专业性的解答:

l 问题:背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2)

l 科顺技术回答:底物污染,未避光保存,出现颜色

l 解决方法:弃去底物,重新配置

l 问题:显色淡,灵敏度偏低

l 科顺技术回答:样品不适合做ELISA检测

l 解决方法:样品一般选择培养上清、血清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分)

l 问题:重复性不佳,高CV值

l 科顺技术回答:包被板表面遭到破坏

l 解决方法:洗板加样时尽量小心,避免破坏板的

l 问题:不正常的标准曲线

l 科顺技术回答:ELISA未终止而直接检测450nm和620nm

l 解决方法:TMB显色需终止后检测,否则会出现620nm比450nm读数高的现象。(数值仍有梯度规律)

l 问题:标曲高浓度间无明显趋势

l 科顺技术回答:仅作单波长检测

l 解决方法:由于参考波长读取非特异性检测,如指纹、划痕、水渍等,对结果也有影响。建议最终结果以双波长为最准确。

l 问题:显色淡,灵敏度偏低

l 科顺技术回答:试剂盒未充分平衡

l 解决方法:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)

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原创作者:上海科顺生物科技有限公司

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