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小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)免疫组化试剂盒
点击次数:227
价格:¥1600
更新日期:2026/8/25 0:09:58
生 产 地:中国大陆
产品型号:
商家名片
高*
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相关标签:小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)免疫组化试剂盒
详细内容
产品规格:50T/100T
存储条件:-20℃保存
试剂盒组成:
试剂A 通透液:0.1% Triton-X 100 10 mL(选用)
试剂B 封闭缓冲液(封闭用) 20 mL
试剂C 已稀释的即用型COX-2 一抗(2.5ml)
试剂D 生物素化羊抗兔IgG 1 支(浓度1.5 mg/mL,稀释比为1:300~1:500)50 μL+抗体稀释液20ml
试剂E HRP-SA 复合物1 支(浓度1 μM,稀释比1:50~1:200)100 μL
试剂F DAB 显色液5ml
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育
30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),
37℃湿盒中孵育30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致
结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使
用。
3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS 充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会
影响结果观察。
5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封
片。
产品特点常用抗原修复液:柠檬酸缓冲液(0.01M pH6.0)、EDTA 抗原修复液(pH8.0 或
9.0)等等。其他方法有:一、酶消化修复法二、微波抗原修复法三、直接高压抗原修复法四、隔水式高压抗原修复法
常用的有冰冻切片和石蜡切片两种,二者各有其优缺点,应根据抗原的性质、实验室条件,合理选择之。对未知抗原显示时,同时应用。冰冻切片为ICC研究。
常用的有冰冻切片和石蜡切片两种,二者各有其优缺点,应根据抗原的性质、实验室条件,合理选择之。对未知抗原显示时,同时应用。冰冻切片为ICC研究。
客户好评用于抗原或抗体检测是目前广泛的方法。常用的标记物与抗原或抗体化学连接之后不改变后者的免疫特性。可用于定性定量或定位检测。我公司现货供应,全国包邮,欢迎新老客户来电咨询索取该免疫组化试剂盒或相关试剂盒的详细说明书及报价:小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)免疫组化试剂盒
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