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实验小贴士:为什么做的western最后都没有显出影啊

点击次数:396 发布时间:2017/8/21 17:55:38
 在做western的时候,有一步的“质控”非常重要,就是转膜后的丽春红染色。这一步能鉴定你的蛋白是否已经转在膜上了。如果丽春红染色有条带,说明是后续的抗体杂交或者曝光的问题,如果丽春红染色都没有条带,说明问题出现在转膜之前的步骤,如蛋白样本出现问题、跑胶出现问题、转膜出现问题等。另外,做实验要弄清楚每一步的原理,你说“电泳过程中条带我看的很好,转膜我也感觉没有问题”,应该都是没有道理,而只是你的直觉的,想要真正找到原因,要一步一步来排查的。另外如果一点都没显影的话,应该不是牛奶浓度的问题,也应该不是抗体浓度的问题,这些只会影响你的显影质量而不会影响你是否出条带。

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