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标准曲线做不好的原因?
点击次数：733 发布时间：2019/5/8 10:41:18
商家名片
钱**
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五月的天，正是春末夏初。像是一个最温柔的笑，五月，既没有刚入春时的料峭之寒，也没有盛夏时的炎炎浮躁与慵懒。温和而不疏淡，热烈但不拘束，天空沉静，草木欣然。难得的自在与闲散，一个人静坐，默默抒写情怀。不经意间，我五月的心思，竟如不紧不慢的细碎步子，款款走进了江南。
近日，上海复旦大学张同学，在我司购买了大鼠相关指标的抗体，想要自己包被elisa试剂盒，张同学是个ELSIA实验小白，为了研究大鼠干扰素相关指标的实验，做完大鼠γ干扰素ELISA实验后反应标准曲线的梯度都不好。刚加完显色剂的时候梯度还算明显，但是显色比较浅，随着时间延长（大概6、7分钟）以后梯度就不明显了。终止反应后测得的值梯度就没有了。特咨询我司技术帮忙分析原因所在。
我司技术人员听到张同学的疑问后，迅速整理了相关可能存在的原因，并罗列如下：
1.刚加完显色剂时梯度明显：显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。
2.酶浓度太高，导致最后显色结果都是高的。
3.包被-酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强，或者酶标仪读数范围不够。
4.样本中有能够催化底物的物质，没洗下来。
5.建议：包被、酶标重新做梯度，先用较低的浓度把梯度摸索好，然后再优化灵敏度，最后调出所需的灵敏度、线性范围。
6.有条件的话，可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上，加完底物三分钟读数。
7.蛋白系统灵敏度够的话，显色十分钟就差不多了。
8.酶是自己标的这种情况的，HRP比例不要太高。
上海沪鼎一直致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供专业的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。优秀的产品和完善的服务使我司在行业内获得了良好的口碑，并且发展成为国内生物试剂和消耗品的知名企业之一。
原创作者：上海沪鼎生物科技有限公司
