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ELISA实验常见问题解析
点击次数:741 发布时间:2019/4/16 10:41:28
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钱**
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问题一:想在肿瘤病人血清中利用ELASA监测因子的表达水平,但由于不能及时提取血清,所以将全血冻存在-20度冰箱中。请问这样的冻存血可以再提取血清做ELASA吗?
回答:不可以的
原因分析:
1.冻血过后解冻了就溶血的。
2.全血冻存的话,红细胞会裂解,血清会被红细胞液污染。
正确做法:
一般是先把全血中的血清(血浆)分离出来再进行分装-20摄氏度冻存保藏,避免反复冻融
问题二:用于ELISA检测的血清如何获得?保持条件是否有特殊条件要求?实验时如何解冻血清才不会使产品质量受损?
回答:取需血清的时候需要小心一些,取中间的血清层,上面可能有白色的脂类,尽量不要取。血清分装后-20或者-70保存都可以,避免反复冻融。尤其提醒客户切记冻存血不可以再提取血清做ELASA实验,关于血清解冻我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
原因分析:
1.冻血过后解冻了就溶血的。
2.全血冻存的话,红细胞会裂解,血清会被红细胞液污染。
问题三:血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
回答:血清在解冻过程(包括没有完全解冻)或储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原和玻连蛋白等)可能会聚集成团,形成絮状沉淀或外观混浊;在运输过程中,由于时间较长,所以往往有少许解冻,因此也可能稍有沉淀,但这些都不影响血清性能。若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。
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