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ELISA试剂‘真面目’

点击次数:664 发布时间:2018/12/24 11:40:01
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一直都说elisa试剂盒做科研实验怎么怎么好,但是还是有很多朋友们不知道ELISA试剂盒的“真面目”,今天,小编就带你来看看吧!
抗原在ELISA中运用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有3类,天然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。天然抗原的纯度不高,特异性不强;合成抗原一般为多肽片段,缺少天然抗原所具有的立体结构表位,亲和力不高,可能导致相应表位的抗体漏检;基因重组抗原具有安全、特异性强、亲和力高、产量大等特色,是一种比较抱负的抗原,但其纯化比较困难。

抗体在ELISA中运用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。多抗取白免疫动物的抗血清,制备较简单,但抗血清成分杂乱,除含针对抗原(多个表位)的抗体外,还含有多种其他抗体,亲和力和特异性相对要低于单抗,且制备周期长,批间差异较大。而单抗仅针对抗体的单一表位,亲和力和特异性均较多抗高,且制备技能老练,产量大,批间差异小,但结合位点的单一也正是其缺点之地点,在双抗体夹心法中,如包被和指示抗体运用同一单抗,则因为结合位点的缺少,容易构成假阴性成果。在运用双单抗一步法时,应留意抗原过剩时的“钩状效应”

在ELISA中酶效果于底物后生成有色物质、荧光物质或导致化学发光,别离可用分光光度计、荧光光度计丈量及照度计丈量。荧光和化学发光测定的敏感度均高于比色测定,标准曲线的线性规模亦较比色反响宽,测定效果优于常用的比色ELISA。

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