WB同一批次蛋白跑出的条带为何不一致?

WB又叫蛋白质免疫印迹，是很常见单很重要的一个分子生物学实验。然而，大家常常会遇到各种问题，特别是实验新手，有时候不知道如何下手！今天上海沪鼎生物小编在某一论坛上看到这样的一篇帖子，特整理来与大家一起探讨！

问题：每次提蛋白后会将样品在短时间内重复 2-3 次WB，但是每次跑出的条带趋势不一致，上样量和其他条件都没有变，内参基本是整齐稳定的，不知道为什么目的条带就是不一致呢？

回答一：内参稳定说明上样量稳定（应该大致是一样的），所以不存在什么上样量不一样的问题；出现这样的结果，问题出在每一步都有一定的可能性，比如电泳，转膜，敷抗体，显色等等。但据以往的经验，WB最关键的还是转膜和敷抗体步骤，可能是您敷抗体的时候敷的不均匀。建议您在仔细的做几遍哦！

回答二：这个问题以前在做 western blotting 的时候也遇见过，内参一致，而目的条带每次都不一样！原因可能是在显影液环节，简单来说就是您的膜没有淋干净，上面残留参差不齐的 T/TBS，T/TBS 能稀释显影液，目的条带本来表达量就少，某一个点残留的 T/TBS 稍微多一点就可能导致显影效果下降，所以建议在显影液反应前，尽量将膜上的洗膜液淋掉（当然也不能让膜干了，要是实验室富裕的话，也可以多添点显影液，效果一样）。

看完以上的内容，您是不是也有更好的答案呢？上海沪鼎生物为了适应市场需要和长远发展，近年来，引进相关技术专业人才和消化国外先进的技术，不断进行产品和技术的更新改进，同时完善的质量，提高企业的整体管理水平，保证体系，专业、规范、高效是我们技术服务要求，科研实验用品专业供应商之一，始终坚持；专注品质、信守承诺、锐意进取，满足于每一位老师的实验要求，期待我们更美好的共赢发展！

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