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常见的酶联免疫分析实验问题您知晓多少?

点击次数:729 发布时间:2017/5/17 11:20:37
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在操作酶联免疫分析试剂盒实验时,有很多技术问题是比较常见且易错的,而就是这些问题困惑不少实验操作员。今天上海沪鼎生物根据技术部的问题处理总结,一起来看看这些常见的酶联免疫分析实验问题您知晓多少?

一、重复性差怎么办?
1.样品数量不一,加样时间长短不一(沪鼎来解决:重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近)。
2.酶标仪滤光片不对或输入波长不对(沪鼎来解决:TMB显色用450/630波长)。
3.酶标仪测定重复性差(沪鼎来解决:校对酶标仪)。

二、为什么标准曲线线性较差
需要按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,彻底收集粉末;确保标准品完全溶解和混匀,然后再进行后续的系列稀释步骤,确保每一步都充分混匀且精确移液;显色的恰当终止;选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。

三、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作
温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。

四、为什么必须设置复孔?
为获得更准确的实验结果,强烈建议标准品及样本进行复孔检测,因为复孔检测可以:计算平均值,确保实验结果更准确;解决实验中误操作造成的跳孔现象;计算CV值,对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。

沪鼎生物致力于提供生命科学领域的技术服务,提供全方位实验技术服务(技术指导、免费代测、上海地区可上门取样等),为广大科研工作者大大节省了重复劳动的时间和精力,我们有过硬的技术咨询和完善的售后服务,为您解决后顾之忧。如果您也对是我司的产品感兴趣,欢迎来电咨询订购!

原创作者:上海沪鼎生物科技有限公司

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