胆固醇的液相色谱HPLC检测方案

【胆固醇】作用

胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙迷等溶剂。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料。胆固醇经代谢还能转化为胆汁酸、类固醇激素、7-脱氢胆固醇，并且7-脱氢胆固醇经紫外线照射就会转变为维生素D3，所以胆固醇并非是对人体有害的物质。胆固醇还是临床生化检查的一个重要指标，在正常情况下，机体在肝脏中合成和从食物中摄取的胆固醇，将转化为甾体激素或成为细胞膜的组分，并使血液中胆固醇的浓度保持恒定。当肝脏发生严重病变时，胆固醇浓度会降低。而在黄疸性梗阻和肾病综合征患者体内，胆固醇浓度往往会升高。

胆固醇的液相色谱样品处理过程

精密称取胆固醇粉末0.05g(至0.1mg)，用无水乙醇溶解定容至50mL备用；再用无水乙醇稀释至所需浓度。用0.45µm的有机系滤膜过滤，精密量取10µL，注入液相色谱仪，记录色谱图。

胆固醇的液相色谱HPLC检测方案色谱条件

色谱柱： C18反相色谱柱, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm

流动相:甲醇

波长：205nm

流速：1.0mL/min

进样量：10µL

柱温：38℃

胆固醇的液相色谱HPLC检测方案谱图

液相色谱仪器配置

高压输液泵 0.001-9.999ml/min 1台

紫外检测器 190⁻⁷00NM 1台

手动进样阀 含触发开关 1套

阀安装支架 1套

液相色谱柱 C18反相色谱柱 1支

微量进样器 100ul 1支

维护工具包 液相色谱启动工具 1套

色谱工作站 N2000或Clarify 1套

超声清洗仪 1套

真空抽滤装置 带真空泵 1套

分析天平 感量0.1mg 1 台