果糖-1,6-二磷酸(Fructose-1,6 Diphosphate，FDP)试剂盒说明书

微量法  100T/48S 

测定意义

果糖 1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖解途的重要中间体，广泛存

在于动植物和微生物体内，能影响胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能物的代谢，

促进组氧的释放，广泛用于临床医药制剂。

测定原理

醛缩催化果糖 1,6-二磷酸降解，产物与 DNPH缩合成紫红色物质，在540nm有特征吸收

峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制

试剂一：液体 105mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体 0.4mL×1支，4℃避光保存。

试剂三：液体 4mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂四：液体 16mL×1瓶，4℃保存。

样品处理

1.组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL

试剂一），加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，12000rpm离心10min，取上清待测。

2.细胞：按照胞数（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500

万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔 7秒，

总时间3min）然后 4℃，12000rpm离心 10min，取上清待测。

3.液体：直接检测。

测定操作

对照管测定管

样品（µL）

试剂一（µL）

试剂二（µL）

20

40

4

44

充分混匀，37℃反应30min

试剂三（µL）

试剂四µL

40

充分混匀，37℃温育10min

160

40

160

充分混匀，于 37℃温育 10min，于微石英比色皿/96孔板，蒸馏水

调零，测定 540nm处吸光值，记为 A对照管和  A测定管，△A=A

测定管-A对照管

计算公式

a.用微石英比色皿测定的算公式如下

标准曲线：y=0.6971x+0.0012，R2=0.9983

1．按照质量计算

FDP（mg/g）=(△A-0.0012)÷0.6971×V反总÷（W×V样÷V样总）

=18.94×(△A-0.0012)÷W

2．按照细胞数量计算

FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷（W×胞数÷V样总）

=18.94×(△A-0.0012)÷细胞数

3．按照液体体积计算

FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971×V反总÷V样

= 18.94×(△A-0.0012)

V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，

g；V样总：加入提取液体积，1mL

b.用96孔板测定的算公式如下

标准曲线：y=0.3486x+0.0012，R2=0.9983

1．按照质量计算

FDP（mg/g）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×V样÷V样总）

=37.88×(△A-0.0012)÷W

2．按照细胞数量计算

FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷（W×细胞数量÷V样总）

= 37.88×(△A-0.0012)÷细胞数量

3．按照液体体算

FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.3486×V反总÷V样

= 37.88×(△A-0.0012)

V反总：反应总体积，0.264mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；W：样本质量，

g：V样总：加入提取液体积，1mL

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