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细胞表面标记及抗原决定簇性质的研究
点击次数：396 发布时间：2016/8/8 8:46:16
细胞表面标记及抗原决定簇性质的研究
流式细胞术在细胞表面标记，特别是肿瘤细胞表面标记的研究中，以及在细胞分类和亚群的分析上，开始了一场细胞免疫学的革命。尤其在细胞表面标记分析上，占有举足轻重的地位。这是由于这些亚群的细胞在不同分化和成熟阶段以及在恶变中出现新的标记，相应的单克隆抗体增加，因而在免疫分型及疾病诊断上，对这种技术的依赖性也越大。
血液系统细胞表面标记的研究 结合针对血液系统细胞不同表面标记的单克隆抗体的应用，已把淋巴细胞的亚分类引伸到淋巴白血病和淋巴瘤的研究、分类和诊断上。用此技术做细胞免疫分型，能使我们更多地定量了解淋巴增殖性疾患的生物学特点，提供更合理的免疫诊断方案。
细胞群体及细胞表面标记变化的监测 利用抗表面标记的单克隆抗体同流式细胞计结合，可以监测体内外细胞表位及细胞亚群的微小变化，有利于发现恶变的肿瘤细胞，或在免疫治疗及宿主排斥反应中原抗原决定簇发生改变的细胞群体。还可以测定因试验或临床治疗中诱导作用引起的某些细胞的免疫原性改变，或者测定经过具有决定新的抗原决定簇表达的基因传染的细胞表面标记的表达，其至可找到新的肿瘤抗原。
细胞表面抗原决定簇性质研究 我们在做任何细胞表面标记鉴定时，都必须回答这种标记的构成性质：蛋白、糖蛋白、类脂。用相应的单克隆抗体配合酶类（如神经氨酸酯、链霉蛋白酶、木瓜蛋白酶等）生物合成抑制剂（Purimycin，Cycloheximide，Tunicamycin），化学药物（过碘酸钠，EDTA/2-疏基乙醇、甘氨胆酸盐），外源凝集素（Lectin），醣类、抗原调变剂等交替在不同条件下用用于细胞，通过FCM的荧光测定，即可定量的获得有关这些细胞表面分子结构和抗原决定簇的化学性质及成分比例，以及他们同细胞膜的二硫键式二价离子桥型的结合关系。
细胞表面标记的分子变化的定量分析 某一细胞群体成熟的不同阶段或外源基因转染细胞后，对这些基因造成的表面标记表达的微小改变的检查，有利于分子免疫学的研究，也为临床定量诊断提供一种手段。用标记已知FITC分子数量的定量微球及FITC标记的有关抗体着染的靶细胞做FCM分析，通过各自峰值倒数（channel），再用荧光素、抗体结合比（F/P），按一定公式即可算的每个细胞的抗原决定簇数。Lemonnier及Waston等在做HLA重链基因转染鼠类细胞表面HLAI型抗原分子表达及抗人C补体受体研究时，把敏感度提高到每个细胞结合FITC小于0.1Attogram水平（1ag=10-18g），测得每个抗体结合0.9个FITC分子。每个细胞结合FITC分子130—150个；结合上的C补体为730个。
