固定的步骤和各种固定方法的优缺点

1、固定的步骤有哪些（包括固定时间、条件等）？
（1）切片前的组织固定：一般石蜡切片前需对组织进行固定，多为12~24h。
（2）切片后的组织细胞固定：一般室温5~10min，4度30~60min。
2、各种固定方法的优缺点是什么？
1）醛类固定剂：双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强，收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和肓吹谋昙切Ч己茫尘扒逦浅Ｓ玫墓潭痢?细胞
2）非醛类固定剂Pe等人比较几种非醛类双功能试剂指出，碳化二亚胺、二甲基乙酰胺、二甲基辛酰亚胺、和对苯醌等均适用于多肽类激素的组织固定，单独使用时，边缘固定效应重，但与戊二醛或多聚甲醛混合使用，效果明显改善。
3）丙酮及醇类固定剂：系最初免疫细胞化学染色的固定剂，其作用是沉淀蛋白质和糖，对组织穿透性很强，保存抗原的免疫活性较好。但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，解决的办法是和其它试剂混合使用，如加冰醋酸、、甲醛等。

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