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Elisa实验中牛奶样本收集方法
点击次数:159 发布时间:2015/5/4 10:14:07
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王**
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ELISA技术的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
牛奶和奶粉前处理方法
(a)牛奶前处理方法
┅┅取牛奶样本,3000g以上,10℃离心10min,吸除上层脂肪;
┅┅取5ml去除脂肪牛奶样本至10ml聚苯乙烯离心管中,加入150ulC液(见配液1)出现沉淀,振荡15s,再加入150ulD液(见配液2),振荡1min充分混合;
┅┅3000g以上,15℃离心10min,移取上层液;
┅┅用复溶工作液(见配液6)以等体积稀释上层液(1份上层液+1份复溶工作液);
┅┅取50ul用于分析。
注:如果离心后仍然浑浊,再重复脱脂过程。
原创作者:上海抚生实业有限公司



