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细胞培养常用的基本设备以及应该当注意的几个方面
点击次数：670 发布时间：2016/11/28 11:39:18
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陈**
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细胞培养常用的基本设备
（1） 仪器
a）显微镜：倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
b） 培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，最适温度是37℃，温差变化一般不应超过±0.5℃，细胞在温度升高2℃ 时，持续数小时即不能耐受，40℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO2培养箱。
c）干燥箱：用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。
d）水纯化装置：细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。
e）冰箱：细胞培养室必须配备。a、普通冰箱或冷藏柜——储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本。b、低温冰箱（-20℃）——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。
f）细胞冷冻储存器：储存器常用的是液氮容器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小，取放使用方便及液氮挥发量（经济）三种因素。
g）离心机：进行细胞培养时，常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作，通常需要使用离心机。一般可常规配置4000rpm的国产台式离心机，例如细胞沉降，使用80～100g的离心机即可，离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
h）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
i）消毒器：一般为高压蒸汽灭菌锅，直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
j）滤器：目前细胞培养工作中采用的培养用液，包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质，这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多采用滤过消毒以除去细菌。目前常使用的滤器有Zeiss滤器、玻璃滤器和微孔滤器，各种滤器有其使用原理和特点。细胞培养进行实验遵守的几个方面：
1．无菌操作区
（1）无菌操作区：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。
理想的无菌操作室应划为三部分：
a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
（2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。
2．孵育区
本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
3．制备区
在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
4．储藏区
主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。
5．清洗和消毒灭菌区
清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
琥珀酸标准品别名：二丁酸、亚乙基二羧酸英文名称：Butane diacidCAS 编号：110-15-6
泽泻醇C-23-醋酸酯标准品别名：泽泻醇C单乙酸脂英文名称：Alisol C monoacetateCAS 编号：26575-93-9
7-乙基-10-羟基喜树碱标准品别名：英文名称：7-Ethyl-10-hydroxycamptothecinCAS 编号：86639-52-3
木糖标准品别名：木质醛糖;戊醛糖;D-戊醛糖;D(+)木质醛糖;戊醣;D-(+)-木糖英文名称：D-XyloseCAS 编号：58-86-6
三白草酮标准品别名：英文名称：sauchinoneCAS 编号：177931-17-8
反式茴香脑标准品别名：英文名称：trans-AnetholeCAS 编号：104-46-1
β-谷甾醇标准品别名：英文名称：β-SitosterolCAS 编号：83-46-5
脱水淫羊藿素标准品别名：淫羊藿素英文名称：AnhydroicaritinCAS 编号：38226-86-7
人参皂苷Rh2标准品别名：(R型)人参皂苷RH2英文名称：Ginsenoside Rh2CAS 编号：78214-33-2
原薯蓣皂苷标准品别名：原薯蓣皂素英文名称：ProtodioscinCAS 编号：55056-80-9
L-蛋氨酸标准品别名：L-γ-甲硫基-α-氨基丁酸;蛋氨酸;L-甲硫氨酸;L-2-氨基-4-甲硫基丁酸;L-2-氨酸-4-甲硫基丁酸;L-甲硫基丁氨酸;L-甲酸氨酸英文名称：L-MethionineCAS 编号：63-68-3
鹰嘴豆芽素A标准品别名：英文名称：Biochanin ACAS 编号：491-80-5
5-羟色胺标准品别名：5-羟基色胺盐酸盐英文名称：Serotonin hydrochlorideCAS 编号：153-98-0
脱水穿心莲内酯标准品别名：穿心莲丁素英文名称：DehydroandrographolideCAS 编号：134418-28-3
刺芒柄花素标准品别名：芒柄花素、生原禅宁B英文名称：FormononetinCAS 编号：485-72-3
标准品别名：狄高辛;狄戈辛;地谷新;毛地黄叶毒苷;异羟基洋地黄毒苷原;长叶毛地黃苷英文名称：DigoxinCAS 编号：20830-75-5
愈创木酚标准品别名：邻甲氧基苯酚;1,2-甲氧基苯酚;甲基儿茶酚;邻甲氧基酚;邻羟基苯甲醚;愈疮木酚;2-甲氧基苯酚英文名称：GuaiacolCAS 编号：\ 90-05-1
原苏木素B标准品别名： 原巴西苏木素英文名称：Protosappanin BCAS 编号：102036-29-3
告达庭标准品别名：告达庭;牛皮消素英文名称：CaudatinCAS 编号：38395-02-7
芸香柚皮苷标准品别名：英文名称：NarirutinCAS 编号：14259-46-2
5-O-甲基维斯阿米醇苷标准品别名：英文名称：5-O-MethylvisammiosideCAS 编号：84272-85-5
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