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ELISA试剂盒标准曲线的拟合以及注意事项

点击次数:705 发布时间:2016/10/31 15:15:19
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elisa试剂盒用于免疫检测的所谓“标准曲线"其实称为拟合曲线比较合适。免疫检测时标准点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度如果和相应的吸光度(OD)值如果能 够呈现直线关系当然是最理想的了,这时可以通过EXELL等方便的获得拟合曲线,进而推算出样品的浓度值。但我们做免疫检测很少有时候能够有这么理想的情 况,标品浓度和相应OD值往往是"S"型的曲线关系,这时就不能用直线拟合的方式了,而对拟合方法进行选择就是必要的了。
ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意

1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999.
磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 0.1ml英文名称:phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 0.2ml英文名称:phospho-ASK1 (Ser967)
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 0.1ml英文名称:phospho-ASK1 (Thr845)
磷酸化活化复制因子2抗体 0.1ml英文名称:phospho-ATF2 (Thr69/71)
磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 0.1ml英文名称:Phospho-ATP1A1 (Tyr10)
磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体 0.1ml英文名称:Phospho-ATP1A1 (Ser16)
乙酰辅酶A羧化酶抗体 0.2ml英文名称:Acetyl CoA Carboxylase
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体 0.1ml英文名称:Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78)
磷酸化Ack1抗体 0.1ml英文名称:Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 0.1ml英文名称:phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 0.1ml英文名称:phospho-AMPK beta 1 (Ser108)
磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 0.1ml英文名称:phospho-ALK (Tyr1604)
磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 0.1ml英文名称:phospho-ATM(Ser1981)

原创作者:上海邦景实业有限公司

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